Фекалий на дисбактериоз
Бактериологического исследования
РЕЗУЛЬТАТ
Порядок проведения работы
1. Просчитывается количество выросших на чашках колоний и регистрируется наличие роста в пробирках бифидумбактерий и клостридий.
- Кишечной палочки нормальной - 40 колоний
- Кишечной палочки лактозонегативной - 5колоний
- Кишечной палочки гемолитической - нет
- Стафилококка золотистого - 2 колонии
- Энтерококка - нет
- Патогенных микробов - нет
- Условно-патогенных - нет
- Бифидумбактерии дали рост при посеве фекалий в разведении - 10-11
- Лактобактерии дали рост при посеве фекалий в разведении 10-4 - 2 колонии
- Грибы кандида - 5 колоний
- Клостридии дали рост при посеве фекалий в разведении 10-3
- Бактероиды - нет
2. Используется формула для расчета:
А = х . у . х1 , где
А - число микробных клеток данного вида
х - число выросших на чашках колоний данного вида
у - посевная дозе (0,1 мл) = 10
х1 - степень разведения фекалий (10-7) = 10 000 000
Таким образом, в фекалиях содержалось:
1. Кишечной палочки нормальной
А = 40 .10 . 10 000 000 = 4 . 109 КОЕ/г
2. Кишечной палочки лактозонегативной
А = 5 . 10 .10 000 000 = 5 . 108 КОЕ/г
3. Стафилококка золотистого
А = 2 . 10 .10 000 000 = 2 . 108 КОЕ/г
4. Бифидумбактерии-за их количество берется самая большая степень разведения
фекалий, которая при посеве на среду Блаурок дала рост А = 1011 КОЕ/г
5. Лактобактерии - за их количество берется самая большая степень разведения
фекалий, которая при посеве на среду Рогозы дала рост и умножается на число
выросших на данном секторе в чашке со средой колоний
А = 6 . 104 = 6 . 104 КОЕ/г
6. Грибы кандида
А. А = 2 . 10 . 100 = 2 . 103 КОЕ/г
7. Клостридии перфрингенс - за их количество берется самая большая степень
разведения фекалий, которая при посеве на среде Сидоренко дала рост
А = 103 КОЕ/г
8. Общее микробное число
А = 120 . 10 . 10 000 000 = 1,2 . 1010 КОЕ/г
После заполнения бланка результатов исследований, врач, согласно установленным концентрациям различных видов микроорганизмов, ориентируясь на нормативы содержания микрофлоры в кишечнике пишет "Заключение" (табл. 25).
Самостоятельная работа студента.
Материальное обеспечение занятий:
На столе у студента для работы должно быть (по числу студентов):
- Микроскопы
- Краски для метода Грама
- Предметные стекла, стеклографы, иммерсионное масло, фильтровальная бумага
- Чашки, пробирки с посевами фекалий, произведенными в предыдущий день
Наглядные пособия:
- Комплект демонстрационных посевов фекалий с выросшими колониями кишечных палочек (нормальных, лактозонегативных, гемолитических), энтерококков, стафилококков, грибов кандида, лактобактерий, бифидумбактерий, клостридий.
Таблица 25.
Фамилия, имя, отчество: Иванов А.С.
Возраст35 лет
Анализ сдан первично, повторно (подчеркнуть)
выявлена микрофлора | количество микробов |
1. Общее микробное число (аэробов) | 1,2 . 1010 |
2. Патогенные микробы семейства кишечных | нет |
3. Кишечная палочка: - нормальная - лактозонегативная - гемолитическая | 4 . 109 5 . 108 нет |
4. Стафилококка S.aureus | 2 . 108 |
5. Энтерококк | нет |
6. Условно-патогенные микробы | нет |
7. Бифидумбактерии | 1011 |
8. Лактобактерии | 6 . 104 |
9. Грибы кандида | 2 . 103 |
10. Клостридии | 103 |
11. Бактероиды | нет |
Заключение: Дисбактериоз llстепени, обусловленный высоким содержанием лактозонегативных кишечных палочек, золотистых стафилококков, грибов кандида и пониженным числом лактобактерий. | |
Дата: Подпись врача: |
- Схема бактериологической диагностики дисбактериоза.
- Пестрые ряды, засеянные S.aureus, Enterococcus, Klebsiella.
- Мазки из чистых культур Lactobacillus, Bifidumbacteria, Clostridium, Candida.
Практическая работа студентов:
1. Изучить визуально и под микроскопом (х8 объектив) колонии, выросшие на средах: Эндо, Эндо с кровью, ЖСА, Плоскирева, Сабуро, Рогозы, ВСА
2. Сделать мазки из подозрительных колоний, окрасить по Граму, микроскопировать
3. Изучить характер роста Bifidumbacteria на среде Блаурок, Cl.perfringens - на среде Сидоренко, сделать мазки с окраской по Граму
4. Просчитать колонии, выросшие на чашках и пользуясь формулами рассчитать число микробов определенных видов (КОЕ/г)
5. Оформить "Результаты исследований фекалий на дисбактериоз". Составить заключение.
6. Составить 3 задачи по дисбактериозу кишечника, подробно оформить их решение и написать заключение по "Результатам исследования".
7. Зачитать реферат на тему "Дисбактериоз", приготовленный дома
Контроль студентов по:
1. Правильности соблюдения техники безопасности проведения бактериологических работ.
2. Быстроте, аккуратности и правильности подсчета колоний и расчета количественного содержания микробов в фекалиях.
3. Качественному оформлению "Результатов исследования фекалий на дисбактериоз"
4. Реальности ситуации и оригинальности решения задач
5. Интересное и грамотное содержание реферата на тему "Дисбактериоз"
Вопросы заключительного контроля знаний студентов:
1. По каким признакам изучают характер выросших колоний?
2. Описать колонии кишечной палочки на среде Эндо, Плоскирева, ВСА
3. Описать колонии кандида, выросшие на среде Сабуро, колонии золотистого стафилококка - на ЖСА
4. Описать колонии лактобактерий на среде Рогозы, рост бифидумбакьерий на среде Блаурок, рост клостридий - на среде Сидоренко.
5. Как рассчитать количественное содержание микроорганизмов разных видов в фекалиях.
Литература:
1. Котова А.Л., Дмитровская Т.И. с соавт. // Бактериологическая диагностика, клиника и основные принципы лечения дисбактериоза кишечника при сальмонеллезах (Методические рекомендации).- Алма-Ата. - 1978. - 31 с.
2. Воробьев А.А., Пак С.Г. с соавт. // Дисбактериозы у детей. (Учебное пособие для врачей и студентов).- М.- 1998.- 64 с.
3. Эпштейн-Литвак Р.В., Вильшанская Ф.Л. // Бактериологическая диагностика дисбактериоза кишечника. (Методические рекомендации). - М. - 1977. - 21. с.