Методические рекомендации по подготовке к занятию
Для первого ознакомления с клетками животных выбирают в качестве объекта хвостатых амфибий, имеющих среди позвоночных самые крупные клеточные элементы. Препарат представляет собой поперечный разрез доли печени, имеющей вид полоски.
При слабом увеличении на периферии среза виден лимфоидный слой с густо расположенными ядрами. Здесь у амфибий образуются лейкоциты; подобные же скопления лейкоцитов попадаются и в центральных частях среза. Остальная масса органа образована печеночными клетками — гепатоцитами, располагающимися вокруг кровеносных сосудов; разрезы этих сосудов, частью пустые, частью заполненные кровяными клетками, легко заметить и при слабом увеличении. Между гепатоцитами видны темные пигментные клетки.
Ядра гепатоцитов, как обычно в многогранных клетках, имеют округлую форму. Величина их зависит от разреза: ядра, разрезанные ближе к экватору, крупнее, а разрезанные ближе к полюсу — мельче. Изредка встречаются двухядерные клетки. В некоторых клетках ядер не видно, так как разрез клетки прошел мимо ядра.
Лейкоциты, расположенные в лимфоидном слое и в виде скоплений между гепатоцитамй, а иногда и в просвете сосудов, имеют округлую форму; ядра лейкоцитов очень разнообразны по форме: бобовидные, лопастные, кольцевидные или разделены на сегменты, связанные тонкими перемычками.
Митохондрии представляют собой клеточный органоид, в состав которого входит комплекс липоидно-белковых веществ. При обычных фиксациях этот комплекс не сохраняется, а потому на обычных препаратах митохондрии не видны (изредка они сохраняются при формалиновой фиксации). Для их сохранения употребляются фиксаторы, в состав которых входит осмиевая кислота, фиксирующая липоиды и переводящая их в такое состояние, при котором они сохраняются во время дальнейшей обработки. Для окраски митохондрий существует ряд методов, из которых наиболее простым и надежным является окраска железным гематоксилином по Гейденгайну
Пластинчатый аппарат еще более, чем митохондрии, нуждается в специальных методах выявления, так как липоидно-белковый комплекс, образуемый этим аппаратом, значительно лабильнее, чем у митохондрий. Существует два метода выявления аппарата для световой микроскопии:серебрение и продолжительное осмирование. В обоих методах препараты не нуждаются в последующем окрашивании. Элементы препарата чернятся и выделяются на более светлом фоне.
При слабом увеличении видно, что железистые клетки поджелудочной железы имеют приблизительно конусовидную форму. Секрет (продукт, подлежащий выделению) скопляется в апикальной (верхушечной) части клетки. Ближе к базальной части располагается ядро. Нужно выбрать группу удачно разрезанных секреторных клеток (желательно, чтобы разрез проходил вдоль конуса) и при сильном увеличении проверить степень выявления в клетках аппарата.
Центросома представляет собой органоид, для выявления которого не существует специальных методов. Лучше он обнаруживается на препаратах, фиксированных сулемовыми смесями, и при окраске железным гематоксилином. Однако нужно иметь в виду, что и при указанных методах центросома видна далеко не постоянно, так что этот органоид принадлежит к числу трудновыявляемых структур.
Литература 6, с 27-35
Контрольные вопросы:
1 Какие компоненты клетки можно рассмотреть в оптический микроскоп?
2 Какие органеллы составляют структуру клетки?