Генно-инженерных технологий

Этические проблемы использования продуктов

Таким образом, одним из главных|головных| международных требований|востребования|, связанных с развитием и применением биотехнологии в науке и производстве, является биобезопасность проведения исследований, полевых и других испытаний|опробования| ГМО, а также биобезопасность высвобождения ГМО, которые владеют|обладают| новыми желательными|желаемыми,желанными,угодными| признаками, на товарный рынок. Под биобезопасностью в данном контексте понимает система мероприятий|мер|, направленных на предотвращение или снижение до безопасного уровня неблагоприятных влияний ГМО на здоровье человека и окружающая среда при осуществлении генно-инженерной деятельности.

Международная структура биобезопасности и структура биобезопасности отдельных государств включают у себя ряд основных компонентов. Во-первых, к|до| ним относится законодательная база, что регулирует ГИТ. Во-вторых - административная система, которая контролирует законный порядок осуществления ГИТ. В-третьих - система обоснованного принятия решений, которая|какая| включает оценку|отметку| и предупреждение соответствующего риска ГИТ (управление риском ГИТ). И, наконец, механизм информирования общественности и ее участия в принятии решений о разрешении ГИТ и контроли над их выполнением|исполнением|. Каждый компонент структуры биобезопасности существенен и функционирует в органической|органичной| связи с другими.

Для получения экономической|экономичной| выгоды от внедрения биотехнологии в производство в нынешнее время и будущее в каждом государстве должен функционировать регуляторный механизм, который|какой| обеспечит безопасное и устойчивое развитие. Обязательным компонентом такого механизма является идентификация и минимизация любых|каких-нибудь| потенциальных рисков для здоровья человека и окружающей среды, что возникают в результате|вследствие| генно-инженерной деятельности. При этом оценка|отметка| риска проводится на всех уровнях манипуляций: от лабораторных исследований к|до| широкому внедрению ГМО или продуктов, которые содержат ГМО, на товарный рынок. Оценка|отметка| риска при использовании|употреблении| генетически модифицированных микроорганизмов, растений и животных в ходе научно-исследовательских работ и производства - это определение следующих|последующих| параметров: факторов риска ГИТ; вероятности их неблагоприятного влияния на здоровье человека и окружающую среду и масштабов этого влияния. При этом оценка|отметка| риска должна быть сфокусирована быстрее на конечном|концевом| продукте биотехнологии, чем на процессе его производства как такового. Относительно|касательно| генно-инженерной деятельности термином «фактор риска» мы будем определять потенциально возможные прямые и опосредствованные неблагоприятные действия ГМО или продуктов, изготовленных из|с| ГМО (включают ГМО), на здоровье человека и (или) окружающую среду, обусловленные эффектом вставки рекомбинантной ДНК, функционирования трансгенов и передачей трансгенов от ГМО другим организмам. Вероятность осуществления таких влияний и размеры соответствующего убытка в совокупности определяют риск генно-инженерной деятельности. Фактор риска ГИТ - функция неблагоприятных для здоровья человека и окружающей среды признаков ГМО или действий (процессов), обусловленных генетической модификацией, а также условий их проявления (осуществление).

В соответствии с|соответственно| действующими международными правовыми документами (в частности, с директивными документами Европейского Союза) целью процедуры оценки|отметки| риска ГИТ является идентификация всех возможных вредных для здоровья человека и окружающей среды прямых и непрямых, немедленных и отдаленных влияний; оценка|отметка| вероятности осуществления данных действий в рамках рассмотренной ГИТ и размеру убытка здоровью человека и окружающей среды при допущении, что они осуществятся.

Под прямым влиянием понимает первичное влияние ГМО как такового на здоровье человека и среда, которая не требует цепи взаимоувязанных событий. Под непрямым влиянием понимают опосредствованное влияние ГМО на здоровье человека и окружающая среда, которая|какая| осуществляется через|из-за| цепь взаимозависимых событий. В частности, оно может проявляться в результате|вследствие| взаимодействия ГМО с другими организмами; в результате|вследствие| перенесения|переноса| генетического материала от ГМО другим организмам; в результате изменений|смены| порядка эксплуатации объектов хозяйственной деятельности и управления ими, предопределенных высвобождением ГМО, и так далее. Немедленное влияние ГМО на здоровье человека и окружающая среда наблюдается непосредственно в период осуществления ГИТ. Оно также может быть прямым и непрямым. Отдаленное влияние становится очевидным в виде прямого или непрямого после окончания данной ГИТ.

• Есть ли потенциальный риск ГИТ приемлемым в сопоставлении с выгодами, получаемыми в результате ее осуществления?

• Есть ли регуляторные механизмы, адекватные для безопасного осуществления ГИТ.

Принцип принятия мер предосторожностей впервые сформулирован в международном соглашению в рамках «Мировой естественного|природного| хартии» (World Charter for Nature), принятой Генеральной Ассамблеей ООН в 1982 году. С этого времени он присутствующий во многих международных документах и договорах, которые касаются охраны|охранения| окружающей среды. Относительно|касательно| биологического многообразия принцип принятия мер предосторожностей записан в преамбуле Конвенции о биологическом многообразии, которая|какая| говорит, : «Когда есть угроза существенного уменьшения|сбавки| или исчезновение биологического многообразия, отсутствие полной научной определенности не должно быть причиной для непринятия|неприятия| мероприятий|мер| к|до| исключению или минимизации такой угрозы». Сегодня этот принцип содержат больше|более| 20 интернациональных законов, договоров, протоколов и конвенций. В недавно набрал действие Картахенському протоколе о биобезопасности к|до| Конвенции о биологическом разнообразии данный принцип опять|снова| подтверждается относительно|касательно| проблемы безопасности ГИТ: «Отсутствие научной достоверности через|из-за| недостаточность научной информации и знаний|познания|, которые касаются масштабов возможного неблагоприятного влияния живого измененного организма на сохранение|сбережение,сохранность| и постоянное|устоявшееся| использование|употребление| биологического многообразия в стороне импорта, с учетом также рисков для здоровья человека, не должен помешать этой стороне в принятие соответствующего решения относительно|касательно| импорта живого измененного организма в целью предотвращения или минимизации такого потенциального неблагоприятного влияния ».

Принцип принятия мер предосторожностей является по существу политической аксиомой. Существуют значительные противоречия|противоречивость| относительно|касательно| его трактовки и применения к биотехнологии и, в частности, к|до| оценке|отметке| риска ГИТ. Его сторонники|поклонник| рассматривают принцип принятия мер осторожности как предупредительный подход к|до| применению новых технологий, направленный на защиту людей, животных и окружающей среды от потенциально неблагоприятных последствий, которые|какие| не всегда может предусмотреть наука. Оппоненты этого принципа рассматривают его как ненаучную позицию, серьезно сдерживающую экономическое|экономичное| и технологическое развитие через|из-за| не обоснованных страхов. Принцип принятия мер осторожности поддается|подвергает| наибольшей критике с точки зрения того, что он изолирует ученых, допускает|припускает| ослабление стандартов доказательной базы, препятствует развитию доказательной методологии и может применяться не обоснованным образом|чином|. Кроме того, в литературе встречается мысль|мнение,суждение|, что он выступает как завуалированный барьер для торговли, например, в случаях, когда нет ни надежных теоретических, ни эмпирических доказательств, устанавливают вероятность убытка. Наиболее жесткая интерпретация принципа (никаких неприемлемых рисков) возлагает груз получения доказательств о безопасности технологии на тех, кто ее внедряет, и требует высоких стандартов доказательств того, что такие риски исключаются|выключают|. Требование|востребование| исключения всякого риска в данном смысле кажется тяжелым|трудным|, если вообще осуществимым|сбыточным| научной заданием|задачей|. Практически|практично| это требование|востребование| можно интерпретировать словами: «не предпринимай никаких действий, пока ты не уверен, что они не нанесут вреда ». Наиболее «слабая» трактовка принципа осторожности - отсутствие полной уверенности не является оправданием для препятствия действиям, которые|какие| могут в принципе нанести вред|ущерб|. Она возлагает груз получения доказательств о биобезопасности ГИТ на тех, кто указывает на сомнительные, необоснованные из|с| научной точки зрения риски ГИТ.

• Пропорциональность соответствия. Мероприятия по управлению риском ГИТ в условиях недостаточности научных данных не должны быть сравнении по природе и масштабом с мероприятиями|мерами|, уже принимались в подобных случаях, когда все необходимые научные данные могли быть получены.

• Изучение выгоды и стоимости действия или отсутствия действия. Такое изучение должно включать экономический|экономичный| анализ (расчет соотношения цены и выгоды), когда он возможен и выполним|исполним,проделаем|.

Следует различать факторы риска генно-инженерной деятельности для здоровья человека в замкнутых системах и хозяйственной деятельности, связанной с высвобождением ГМО в окружающую среду. При оценке|отметке| риска ГИТ в замкнутых системах в первую очередь оцениваются факторы риска для здоровья человека и животных, так как высвобождения ГМО в окружающую среду не предусматривается. К|до| их числу можно отнести следующие|последующие| потенциально опасные|небезопасные| эффекты:

Возможны токсичные|токсические| (включая канцерогенные, мутагенные) и (или) аллергенные эффекты ГМО или продуктов их метаболизма.

Вероятные вредные влияния целевых продуктов ГИТ (возможных токсинов, цитокинов, аллергенов, гормонов и других биологически активных веществ, которые|какие| могут вызывать неблагоприятные последствия при попадании в чувствительные|чуткие| органы, ткани организма человека и животных).

Сравнительная патогенность генно-инженерных микроорганизмов по сравнению с донором, реципиентом (исходным|выходным| родительским организмом).

Способность к|до| микробному обсеменению (колонизации).

Если ГМО являются патогенными по отношению к иммунокомпетентным людям, кроме других рассматриваются следующие|последующие| факторы его патогенности: тип заболевания, которое|какое| вызывается; механизм патогенности, которая включает способ проникновения патогенного организма и вирулентность; инфекционная доза; спектр возможных носителей и возможность его изменения|смены|; возможность выживания ГМО вне организма человека; биологическая стабильность ГМО и способ его распространения.

При оценке|отметке| факторов риска генно-инженерной деятельности для здоровья человека, связанного с высвобождением ГМО в окружающую среду или их использованием|употреблением| в хозяйственной деятельности следует иметь в виду, что высвобождения патогенных генно-инженерных организмов в окружающую среду не предусматривается. Поэтому основными факторами риска для здоровья человека высвобожденных или поступили на товарный рынок ГМО есть их вероятная токсичность|токсический| и аллергенность. В целом к|до| факторам риска в данном контексте можно отнести:

- токсичность|токсический| ГМО (продуктов, изготовленных из|с| ГМО, которые включают ГМО) и снижения питательной ценности продуктов питания и кормов;

- аллергенность ГМО (продуктов, изготовленных из|с| ГМО, которые включают ГМО);

- неумышленная экспрессия генов реципиентного| организма или нестабильность трансгенов.

Таким образом, основными факторами риска, которые|какие| могут вызывать неблагоприятные последствия для здоровья человека, являются:

1) потенциальная патогенность ГМО,

2) потенциальная токсичность|токсический| ГМО и новых продуктов питания,

3) потенциальная аллергенность ГМО и новых продуктов питания;

4) возможность горизонтального переноса генов стойкости к|до| антибиотикам от ГМО патогенной микрофлоры желудочно-кишечного тракта человека.

Оценка|отметка| риска генно-инженерной деятельности выходит|исходил| с того, что патогенные для человека и животных организмы не должны высвобождаться в окружающую среду ни при которых|каких| обстоятельств. Тому, если в рамках генно-инженерной деятельности предусматривается работа с известными патогенными организмами (будь то организмы-реципиенты, доноры, итоговые ГМО) или с недостаточно исследованными организмами, которые|какие| могут оказаться патогенными, она обязательно должна осуществляться в замкнутых системах. При этом все выполняемые|исполняет| в процессе ГИТ операции, которые касаются генетической модификации, хранения|сбережения,сохранения|, культивирования, транспортировки или уничтожения патогенных организмов, осуществляются при условии обязательного соблюдения специальных защитных мероприятий|мер| (Физических, химических, биологических), эффективно защищают|ограждающий| персонал и окружающую среду от контакта с патогенными организмами и от неблагоприятного влияния патогенных организмов. Проведение ГИТ в замкнутых системах должен обеспечить здравоохранение|здравоохранительный| и безопасность следующих|последующих| категорий людей : предсказуемых|предполагаемых| пользователей продуктов ГИТ; персоналу лабораторий или предприятий, которые занимаются ГИТ; других людей, которые|какие| так или иначе могут контактировать из|с| ГМО; население региона| осуществления ГИТ в случае случайного высвобождения ГМО.

• Рассмотрение биологических свойств ГМО для установления предсказуемой|предполагаемой| патогенности их для человека и величины последствий их неблагоприятного влияния.

• Оценки|отметка| вероятности того, что в случае контакта ГМО с человеком данные организмы действительно предоставят неблагоприятное влияние на его здоровье (включая рассмотрение уровня научной неопределенности).

• Определение необходимого уровня защиты, «замкнутости» (level of containment) системы ГМО.

Вынесение предварительного заключения о достаточности предлагаемых мероприятий|мер| защиты здоровья человека при сравнении ГМО с биологическими объектами разных|различных| групп патогенности.

• Рассмотрение сущности предсказуемой|предполагаемой| деятельности и подробный осмотр необходимых мер контроля для защиты здоровья человека.

• Определение любых|каких-нибудь| потенциальных рисков для окружающей среды и дополнительных мероприятий|мер| изоляции на случай неумышленного высвобождения патогенных организмов в окружающую среду генно-инженерными организмами и другими аспектами человеческой деятельности.

6. Организация научного эксперимента с соблюдением основных принципов биоэтики

Основные морально-этические принципы проведения биомедицинских экспериментов на животных сформулированы Международным советом медицинских научных обществ (CIOMS) в Этическом кодексе (1985), включающем раздел «Международные рекомендации по проведению медико-биологических исследований с использованием животных», и Хельсинкской декларацией Всемирной Медицинской Ассоциации (2000). В этих документах гуманное отношение к подопытным животным провозглашается моральным долгом ученых. Признается, что использование животных для научных целей нежелательно и по возможности следует применять методы, не требующие использования животных, однако при существующем уровне знаний использование животных неизбежно. Определены основные этические принципы: непричинение вреда и научная обоснованность исследования. Это значит, что экспериментатор должен стремиться по возможности не причинять животным боли и неудобства, нести ответственность за их состояние и условия содержания, планировать эксперимент и обосновать его необходимость, изыскивая альтернативные способы получения данных без привлечения живых животных. Критериями необходимости использования лабораторных животных для научных и учебных и целей при этом выступают: • выполнение фундаментальных научных исследований, требующих экспериментального подтверждения; • проведение экспериментального этапа доклинических испытаний, направленных на получение результатов, не достижимых другими средствами (разработка новых или улучшение существующих способов лечения, разработка технологии или получение знаний для разработки нового эффективного способа лечения, диагностики или выяснения этиологии и патогенеза заболевания); • обучение технике неотложных оперативных вмешательств, овладение навыками и умениями, необходимыми для последующей работы в клинике, приобретение которых не может быть обеспечено другими способами. На международном уровне правовой основой законотворчества по регуляции проведения экспериментов на животных является Европейская Конвенция о защите позвоночных животных, используемых в эксперименте и для других научных целей (№ 123, 1986 г.), включающая основные положения Этического кодекса СММНО. Директива Совета ЕС «О сближении законов, постановлений и административных положений государств ЕС по вопросам защиты животных, используемых для экспериментов и других научных целей» (86/609/ЕЕС) определила стратегические этические требования в этом направлении: • запрещение экспериментов с использованием животных, если имеется другой (альтернативный) научный метод получения результата; • требование сокращения количества животных, используемых в экспериментах и усовершенствования экспериментальной техники с целью минимизации страданий подопытных животных; • требование компетентности (соответствующее образование и практические навыки) лиц, которые могут быть допущены к работе с животным; • контроль исполнения законов государственными службами и/или Этическими комитетами учреждений; • периодическая отчетность, доступность информации по использованию экспериментальных животных, и мерам, принятым в отношении защиты животных, используемых для экспериментальных целей для общественности; • развитие международной системы специального образования для желающих работать с экспериментальными животными (освоение методов анестезии и хирургической техники, альтернатив экспериментам на животных, знакомство с законодательными и нормативными документами, регламентирующими эксперименты, и др.). Согласно Европейской конвенции по защите прав позвоночных, исследователь может использовать животное «в поисках знаний, здоровья и безопасности» уважая право на жизнь каждого животного, принимая в расчет его способность страдать и помнить, только тогда, когда существует вероятность, что использование животных приведет к получению знаний или к общему улучшению жизни человека или животных». Таким образом, этичность эксперимента выступает как обязательное требование во всех странах мира и является показателем нравственного, профессионального и культурного уровня ученого. Соблюдение этого требования должно стать основанием для обязательного проведения эко- и/или биоэтической экспертизы диссертационных работ естественно-научного, медико-биологического, сельскохозяйственного, инженерно-технического профилей, представляемых к защите. С конца 60-х годов прошлого века была выдвинута и неуклонно продвигается в практику идея альтернативного биотестирования на основе 3 R (Russell & Burch): replace – замещать высших животных в биотестировании беспозвоночными животными, клеточными и молекулярно-биологическими тестами, reduce – уменьшать число высших животных в опытах за счет лучшей статистической обработки материала и refine – улучшать условия работы с самими животными, давать лучший наркоз, обеспечиватькачественные условия содержания и забора биоматериала. Если выполнение первых двух пунктов порой затруднительно (отсутствие соответствующей материально-технической базы, программного обеспечения, отработанных методик и пр.), то улучшение условий работы с лабораторными животными по силам экспериментатору. Следует обеспечить надлежащее использование животных, в том числе исключить или минимизировать дискомфорт, стресс и боль, когда это согласуется с обоснованной практикой научных работ. В первую очередь необходимо правильное, рациональное планирование эксперимента, при котором должны быть учтены следующие этапы: - подбор вида животных; - подбор количества животных и формирование рабочих групп; - проведение эксперимента; - выведение животных из опыта. Что касается выбора видов животных, то важность этого этапа определяется еще и необходимостью дальнейшей экстраполяции – переноса полученных данных на человека. К настоящему времени в целом завершен этап скрининга видов животных, наиболее пригодных к проведению определенных исследований. Так, установлено, что к микроорганизмам и продуктам их жизнедеятельности более чувствительны мыши, a морские свинки традиционно используются при изучении аллергизирующих эффектов химических веществ и т.д. Согласно требованиям GLP исследования на 2-3 видах животных по-прежнему рекомендуется проводить при токсикологической оценке новых химических веществ, лекарственных средств, принимая во внимание, что расчетные данные не всегда могут быть верифицированы экспериментально. Это может быть обусловлено полиморфизмом метаболизма, например, ксенобиотиков, связанного с половозрастными особенностями. Так, есть предположение, что в перечне возможных причин возникновения «талидомидовой катастрофы» одно из мест занимает несоблюдение критерия адекватности выбора вида экспериментальных животных для изучения тератогенного эффекта данного препарата. Выбор количества животных. Весьма распространено при планировании научной работы неоправданное завышение количества животных. Так, стандартной, оптимальной группой является 7-10 животных, однако в ряде случаев количество их можно уменьшить без ущерба для достоверности результатов. Это, например, касается оценки морфологических сдвигов в динамике (для такого анализа достаточно включать в группу 3 линейных животных). Использование линейных животных приближает эксперимент к мировому стандарту. Немаловажно также распределение животных по группам (в зависимости от возраста, пола, физиологических особенностей), a также определение количества опытных групп, групп контроля и сравнения. Снизить количество экспериментальных животных на этом этапе можно за счет использования лабораторного контроля, использования данных одной контрольной группы для нескольких параллельно проводящихся экспериментов. Следующий этап – непосредственно проведение эксперимента. Немаловажную роль при этом играет оснащение экспериментальной лаборатории, в частности, оборудование и инструментарий операционного блока. Так, например, использование в ЦНИЛ БелМАПО операционного стола, специально сконструированного для хирургических вмешательств и проведения манипуляций на животных, позволяет регулировать его размеры (угол наклона панелей до 40°) в зависимости от размера и массы оперируемого животного и требуемого для операции положения, перемещать при необходимости стол вместе с животным (например, из операционной в рентгенкабинет), осуществлять подъем дистальной либо проксимальной части стола с учетом особенностей проводимых операций и манипуляций в зависимости от разноплановости вмешательств (на нижних или верхних конечностях, на грудной или брюшной полостях, трепанация черепа и т.д.). Это обеспечивает максимальное удобство для расположения оперирующего сотрудника и оптимального хирургического доступа, что, в свою очередь, позволяет сократить продолжительность операции, снизить травматизм и ускорить последующую реанимацию. При проведении манипуляций, не требующих обезболивания или наркоза, следует избегать применения веществ и растворов с выраженными раздражающими свойствами. Bсe процедуры на животном, которые могут вызвать у него боль или иного рода мучительное состояние, должны проводиться при достаточном обезболивании (под местной анестезией или наркозом). Однако, принимая во внимание, что каждое наркотическое вещество вызывает помимо общего наркотического действия и ряд функциональных изменений в различных физиологических системах, причем эти изменения носят не однотипный характер, при постановке опыта надо учесть особенности каждого наркотика и выбрать наиболее пригодный. Определяя дозировку наркоза, необходимо принимать во внимание высокую чувствительность ряда видов животных (птицы, некоторые млекопитающие) к данным препаратам. Даже небольшая передозировка для многих из них может стать летальной. При использовании наркоза запрещается использование средств, препятствующих контролю уровня наркоза: афонии, завязывания морды и т.д. При первых признаках осла Фиксация животного должна производиться только после того, как подействует наркоз. Животных надо привязывать так, чтобы не причинить им при этом боли или повреждений, не нарушить нормального кровообращения, a также не изменить правильного положения мышц или частей тела. Применение современных, хорошо отработанных методик, ускоряющих ход операции, способствует сокращению продолжительности периода воздействия анестезии, снижению кровопотери и степени травматизации в целом. Соблюдение правил асептики и антисептики для предотвращения септических и послеоперационных осложнений заключается в стерилизации шовного материала, инструментов, подготовке операционного поля и рук хирурга. Оборудование операционной (манипуляционной) должно обеспечивать поддержание соответствующих санитарно-гигиенических требований. Применение современных методов реанимации способствует восстановлению жизненных функций животного и возобновлению его полноценного существования; благодаря им значительно снижается смертность животных во время хирургических вмешательств и в послеоперационный период. Надлежащий уход в послеоперационный период должен обеспечивать, в соответствии с требованиями эксперимента, быстрое выздоровление животного. Заключительный этап эксперимента – выведение животного из опыта (эвтаназия) и забор биоматериала. Эвтаназия – это быстрое и безболезненное умерщвление. Собаки, кошки и кролики должны подвергаться эвтаназии исключительно в состоянии наркоза (передозировка наркоза: разовая доза х 3). Для мелких животных оптимальным также является передозировка наркоза; допустима быстрая декапитация. Из ингаляционных анестетиков желательны фторотан, хлороформ. При этом крышку сосуда, куда поместили животное, нужно периодически открывать, чтобы крыса или мышь погибали от наркотического действия препарата, a не от удушья (поэтому эфир не рекомендуется). Как показали исследования В.В. Руденка, использование эфира при выведении животных из опыта абсолютно нецелесообразно и потому, что приводит к искажению результатов эксперимента, по крайней мере, на нервной ткани. Недопустимо применение силовых приемов, если животное испугано и сопротивляется. Запрещены следующие способы умерщвления: • с помощью миорелаксантов, ибо животное перестает дышать, но ощущает боль и гибнет при сохранении сознания; • с помощью электротока, так как для остановки сердца и отключения ЦНС требуется некоторое время, в продолжение которого животное испытывает резкую боль, голосовые и моторные реакции отсутствуют из-за развивающегося паралича мышц; причем мелкие животные страдают больше, ибо они более резистентны к току; • с помощью различного рода ядов; • с помощью болезненных инъекций – внутривенных, в область сердца, плевры; • с помощью воздушной эмболии. Во всех случаях, когда возможно исключение из опыта экспериментальных животных, целесообразным и оправданным является использование альтернативных методов, к которым относятся: - хранение информации и обмен информацией о проведенных экспериментах (во избежание их повторения); - использование математических и компьютерных моделей; моделирование биохимических, физиологических, токсикологических, фармакологических и поведенческих систем и процессов. Особенно актуально это на предварительных этапах отработки новых методик хирургических вмешательств, исследования известных веществ и препаратов в новых композициях или комбинациях и др.; - апробирование новых методик хирургических вмешательств на муляжах и трупах, на сосудах живой плаценты; - использование методов in vitro (субклеточные фракции, срезы и культура тканей, в том числе тканей человека). Например, скрининг химических соединений на выявление радиосенсибилизирующей и радиопротекторной активности можно проводить на культурах стабильных клеточных линий HeLa, раздражающее действие самых разных соединений определять с помощью теста на хорион-аллантоисной мембране, определение годности био- или синтетического материала, из которого изготовлены имплантанты, в предварительных исследованиях на культуре тканей; - использование животных с более примитивной психикой или позвоночных животных на ранних этапах их развития; - использование возможностей этологии – науки о поведении животных. Широкое практическое применение этологический профиль нашел в работах Вальдмана, Бабаян и др. - эксперименты с участием людей-добровольцев. От отношения (этичного, ответственного, продуманного) экспериментатора зависят не только жизни животных, на которых проводятся эксперименты, но и здоровье и жизни людей, для которых они проводятся. Правила обращения с лабораторными животными Экспериментально-биологическая клиника (виварий) является научно-вспомогательным подразделением БелМАПО созданным для содержания и разведения лабораторных животных, используемых в медико-биологических исследований. Проведение медико-биологических исследований на лабораторных животных в настоящее время невозможно без установления паритетности стремления экспериментатора достичь в ходе опыта максимально возможного объема и точности информации и соблюдения основных биоэтических принципов. На основании следующих документов: – «Санитарные правила по устройству, оборудованию и содержанию вивариев» (утв. Главным Государственным санитарным врачом от 06.04.1973г., № 1045-73); – «Нормы кормления лабораторных животных» (утв. приказом Министерства здравоохранения БССР, от 10 марта 1966г., №163); – требования GLP и принципов биоэтики при работе с лабораторными животными в БелМАПО были разработаны «Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных» (утв. ректором 16.06.2004г.). В соответствии с Правилами к работе с экспериментальными животными допускаются лица, имеющие высшее медицинское, ветеринарное, зоотехническое, фармацевтическое или биологическое образование, разрешение на право использования животных, Они несут ответственность за соблюдение настоящих Правил. Лица, имеющие среднее медицинское, ветеринарное или зоотехническое образование, знакомые с настоящими Правилами, допускаются к проведению несложных и не болезненных процедур на животных без получения персонального разрешения, но под контролем ответственного лица и под его ответственность. За подготовку экспериментатора к работе с животными и за соблюдение Правил использования животных в целом несет ответственность руководитель кафедры (отдела, лаборатории, кабинета), в которых работает лицо, допущенное к эксперименту на животных. Запрещено посещение вивария посторонним лицам без специального разрешения. Сотрудники учреждения, выполняющие работу в виварии, обязаны: а) соблюдать установленные правила распорядка дня и режим работы; б) вести систематическое наблюдение за экспериментальными животными; в) вести первичную документацию, своевременно заполнять этикетки на клетках с экспериментальными животными; г) посещать только те помещения вивария, в которых находятся животные, закрепленные за данным сотрудником; д) по окончанию эксперимента или любой другой текущей работы с лабораторными животными оставлять свое рабочее место в надлежащем порядке; е) следить за своевременным списанием вышедших из опыта, павших или вынужденно убитых экспериментальных животных; ж) сообщать специалистам вивария обо всех замеченных случаях заболеваний среди экспериментальных животных, а также своевременно уведомлять специалистов вивария о предполагаемых патологических состояниях животных в соответствии с условиями эксперимента. Ответственность за нарушение Правил проведения работ с использованием животных несут руководители учреждений, где проводятся эксперименты, и лица, специально выделенные для проведения этой работы. Нарушение Правил гуманного обращения с животными и проведение экспериментов в условиях, ставящих под сомнение достоверность полученных данных, может повлечь за собой применение к виновным лицам мер дисциплинарного воздействия, а также запрещение научных публикаций, защиты диссертационных работ и запрещение дальнейшего использования экспериментальных животных в научных и учебных целях. Оборудование экспериментальной лаборатории В виварии имеются специальные помещения для проведения экспериментов, где соблюдаются санитарные нормы. В помещении для проведения экспериментов (лаборатории) находятся: запирающийся шкаф для хранения медикаментов, инструментария и документации, стол для фиксация животного; осветительное устройство; наркозно-дыхательная аппаратура; хирургический инструмент (скальпели, иглы — в соответствии с размерами животного) и пр.; медикаменты для ремедикаций, обезболивания животного в ходе операции, обезболивания животного в послеоперационном периоде. Уход за животными в виварии (экспериментально-биологической клинике) Условия содержания животного в виварии должны обеспечивать для него нормальный биологический фон, который включает в себя санитарно-гигиенические требования к помещению вивария, уходу и кормлению лабораторных животных. Содержание животных и их размещение должны соответствовать санитарным нормам. Собаки размещаются в отдельных боксах общей площадью не менее 1,5м2 . Крысы и мыши содержатся на стеллажах в клетках с максимальной нагрузкой на одну клетку не более 10 голов крыс и 30 голов мышей. Кролики содержатся в клетках; на одного кролика должно приходиться 0,5м2. Клетки и боксы не должна сковывать движение животных. Уборка помещения, где содержатся животные, производится: у собак – ежедневно; у кроликов – еженедельно (при содержании на щелевых полах); у мышей и крыс – 1-2 раза в неделю. Порядок проведения процедур на животных. Прием мелких животных (кролики, морские свинки, крысы, мыши и пр.) в виварий осуществляется из специальных питомников, благополучных по инфекционным заболеваниям, при наличии ветеринарного свидетельства (форма 1) или сопроводительных документов от питомника. Закупка крупных животных (собак) производится в пункте отлова и временного содержания бродячих животных с прохождением животным ветеринарного осмотра, с выдачей ветеринарного свидетельства (формы 1). Если животные получены не из специальных питомников, то устанавливается следующий срок их карантина: для мышей и крыс – 14 дней; для морских свинок и кроликов – 21 день; для птицы – 21 день. В период введения в эксперимент животное должно адаптироваться к обстановке лаборатории и привыкать к экспериментатору не менее трех дней. Запрещается использование силовых приемов против животных. Мелких животных (грызунов и пр.) следует брать осторожно, применять корнцанги только с резиновыми насадками, не сжимать животных сильно руками, что причиняет животным травмы и боль. Запрещается переносить мелких животных по холоду в не утепленных клетках. Премедикация. Фиксация животного Премедикация проводится ответственным за работу с животными лицом или под его наблюдением. Если животное напугано или состояние наркоза наступает не сразу, экспериментатор должен ждать, пока животное не успокоится или не заснет. Животное можно фиксировать только после того, как подействует наркоз. Повязки при фиксации конечностей животного должны быть мягкими, не препятствовать кровообращению; животному не должна быть придана неудобная поза с вывернутыми конечностями. Обезболивание. После дачи животному наркоза необходим постоянный контроль со стороны экспериментатора (или анестезиолога) за уровнем наркоза. При использовании миорелаксантов рекомендуется систематическое выведение животного из состояния обездвижения для проверки уровня наркоза. При первых признаках ослабления наркоза он должен быть углублен. Запрещается применение средств, препятствующих контролю за уровнем наркоза: афонии, завязывания морды и т.д. Уход за животными в послеоперационном периоде При доставке животного в клетку после операций должны использоваться удобные носилки, исключающие нанесение животному травм, сдвигания повязок. В случае применения миорелаксантов и искусственного дыхания животное должно оставаться в лаборатории до полного восстановления дыхания, Грызуны, получившие травмы, например, при взятии крови из хвоста, отсаживаются в отдельную клетку во избежание покусов. Животное в хроническом опыте должно быть помещено в удобную клетку, облегчающую также условия наблюдения и ухода за животным. С момента появления у животного болей, оно должно получать седативные и обезболивающие препараты. Животное должно получать квалифицированный уход под контролем экспериментатора. После особо сложных и ответственных операций рекомендуется первые сутки устанавливать круглосуточное дежурство ОКОЛО ЖИВОТНОГО. Состояние животного и назначения препаратов должны отмечаться в протоколе эксперимента. Порядок проведения эвтаназии (умерщвления животного) 1. Гуманным умерщвлением животного – эвтаназией – называется быстрое и безболезненное умерщвление животного, не сопровождающееся у него чувством тревоги и страха. 2. Животное должно получать адекватный уход (анестетики, питание, поение и т.п.) вплоть до самого момента его умерщвления. 3. Умерщвление животных не должно производиться в помещении, где содержатся животные, запрещается умерщвлять одних животных на глазах у других. 4. В острых опытах животное должно умерщвляться до прекращения действия наркоза. Во всех случаях животное должно умерщвляться своевременно до наступления у него болезненных состояний. 5. Оптимальным и универсальным методом умерщвления животных является передозировка наркоза – введение анестетика в летальной дозе (дозировка для наркоза х 3). 6. При соблюдении этих условий допустимо умерщвление животного другими методами: a) мелких животных: мышей, крыс, лягушек, птиц и т.д. – путем декапитации: б) крупных животных: взрослых собак, свиней и пр. – с помощью пропускания электрического тока, при этом электроды вводят в область продолговатого мозга и в область крестца. 7. При необходимости изучать ультраструктуру мозга применяются мгновенные методы эвтаназии (например, мгновенное замораживание при погружении животного в жидкий азот). Использование в этом случае электротока недопустимо. 8. Если предусматривается морфологический анализ тканей мозга с использованием светового микроскопа, то для эвтаназии должны применяться анестетики. 9. Допускается умерщвление животных, используемых в производственных целях, путем обескровливания. При этом может быть подобран метод обезболивания, отличный от фармакологического воздействия. 10. При проведении экспериментов с применением миорелаксантов допускается умерщвление животного путем отключения искусственного дыхания, но лишь в условиях сохранения адекватного наркоза. 11. Допускается умерщвление мелких животных с помощью ингаляционного наркоза без предварительного введения других видов анестетиков. Наиболее пригодным для этих целей является хлороформ. Но при этом эвтаназия должна проводиться в специальной камере, в теплом помещении; подача хлороформа должна вестись очень небольшими дозами – по капле. Только строгое соблюдение этих правил способно уменьшить стрессовое состояние животного, что позволит улучшить качество исследований и уменьшить коэффициент погрешности. Этическая экспертиза биоклинических исследований Медико-биологические исследования и учебные занятия с использованием лабораторных животных Критерии необходимости использования лабораторных животных для учебных и научных целей: • обучение технике неотложных оперативных вмешательств, овладение навыками и умениями, необходимыми для последующей работы в клинике, приобретение которых не может быть обеспечено другими способами; • обучение технике интубации, управляемого дыхания и наркоза, осуществимое только на живом объекте; • обучение способам остановки кровотечения, разъединению и соединению живых тканей, обладающих естественной сократимостью, эластичностью, смещаемостью (подвижностью) и регенераторной способностью, что не может быть воспроизведено другими способами или на иных объектах; • обучение хирургическим операциям и инвазивным манипуляциям в условиях, максимально приближенных к реальности при одновременном исключении фактора риска для жизни и здоровья человека при отсутствии адекватных замещающих способов; • выполнение фундаментальных научных исследований, требующих экспериментального подтверждения, проведение экспериментального этапа доклинических испытаний, направленных на получение результатов, не достижимых другими средствами (разработка новых или улучшение существующих способов лечения, разработка технологии или получение знаний для разработки нового эффективного способа лечения, диагностики или выяснения этиопатогенеза заболевания и т.п.). Правовая основа. Современная медицина не исключает риска диагностических, лечебных и профилактических процедур, особенно в ходе медико-биологических исследований [Хельсинкская Декларация, 2000 г., Введение]. Получению новых достижений в науке и медицине во многом способствует использование животных в качестве объекта исследования и обучения специалистов, поскольку альтернативные модели экспериментов (без использования животных) не могут полностью имитировать сложный организм человека. Порядок работы и все виды использования экспериментальных животных в медико-биологической практике – для научного эксперимента, в целях учебного процесса, биологического тестирования и т.п. – регламентированы Приложением к приказу министра здравоохранения СССР №755 от 12.08.1977. Вместе с тем, необходимо принять во внимание положения Хельсинкской Декларации и рекомендации, содержащиеся в Директивах Европейского Сообщества (№86/609 ЕС), и продолжать усилия, направленные на поиск и разработку альтернативных моделей, дополнительных подходов, а также на усовершенствование исследований на животных. Этические принципы. Теперь рассмотрим этические принципы. Учреждения могут проводить работу на животных при соблюдении следующих условий: 1) наличия вивария (экспериментально-биологической клиники), оборудованного в соответствии с санитарными требованиями №1045-73 от 06.04.73; 2) наличия экспериментальной операционной (лаборатории) с соответствующим оборудованием; 3) наличия штата сотрудников, обеспечивающих уход за животными. Условия содержания животного в виварии (клинике) должны обеспечивать для него нормальный биологический фон и полностью соответствовать требованиям СНИП. При планировании учебных занятий или научных экспериментов должны быть обоснованы вид используемых животных и необходимое для получения достоверных результатов количество. Все процедуры на животном, которые могут вызвать у него боль или иного рода мучительное состояние, проводятся при достаточном обезболивании (под местной анестезией или под наркозом), кроме случаев, оговорённых в Приложении 3 к приказу №755 от 10.08.77 МЗ СССР. ЗАПРЕЩАЕТСЯ использование животного для проведения болезненных процедур более чем один раз, кроме тех животных, используемых для контрольных экспериментов в хронической серии эксперимента. При проведении экспериментов и других процедур в условиях повышенного риска для жизни животных или при выполнении работ на животных малоопытными лицами (например, студентами) должны быть рядом лица, ответственные за исполнение процедуры, контролирующего адекватность обезболивания и состояние животного. В послеоперационном периоде животное должно получать квалифицированный уход и адекватное обезболивание. По завершении учебных или научных манипуляций на животном, приводящих к нарушению его физиологических функций и жизнеспособности, животное должно быть своевременно умерщвлено с соблюдением всех требований гуманности. Эвтаназия, т.е. гуманное умерщвление животного, должно производится ответственным лицом или под его непосредственным наблюдением. Оптимальным и универсальным методом умерщвления животных является передозировка наркоза – введение анестетика в летальной дозе (дозировка для наркоза´3). В заключение необходимо подчеркнуть, что эксперименты не должны проводиться с использованием животных, если существуют другие – замещающие способы получения соответствующих результатов. Основополагающими следует считать Принципы, введённые Russel и Burch: 1) reduction – максимально возможное уменьшение числа животных, используемых для осуществления необходимых учебных или научных целей; 2) refinement – улучшение, совершенствование экспериментальных методик для снижения (исключения) отрицательных (болевых, стрессирующих и др.) влияний на животное; 3) replacement – устранение животных из экспериментальной или учебной работы, если есть возможность получить аналогичные результаты альтернативными методами.

5rik.ru

Материалы для учебы и работы

Генно-инженерных технологий