Переливание крови - это разновидность операции трансплантации - пересадки органа и поэтому необходимо точное определение крови по наиболее клинически значимым системам (АВО и).
СИСТЕМА АВО имеет 4 группы крови-О1, А11, В111, АВ! У.
Методы определения группы крови с помощью стандартных гемагглютинирующих сывороток:две серии стандартных сывороток 3 групп, их готовят на станции переливания крови: срок изготовления, годности10-12 дней, титр 1:32 ,серию,
хранят в темноте при температур н более 20оС. Соотношение капель 1:10, температура окружающей среды 15-18 до 26 оС,5 минут, физраствор для снятия ложной агглютинации.
Если ни в одной из капель нет признаков агглютинации, то это О1,при появлении агглютинации в сыворотках О1 и В111 и отсутствии в А11- вторая, при наличии в О! И А11- В111,при появлении агглютинации с сыворотками всех трех групп - АВ1У.
Различают 4 классические реакции, характерные для 4 групп крови.
Возникновение агглютинации эритроцитов (+) при смешивании крови со стандартными сыворотками
Группа крови | Группа стандартной сыворотки | |||
. | 0(I) | А(II) | В(III) | AB(IV) |
0(I) | - | - | - | + |
А(II) | + | - | + | + |
В(III) | + | + | - | + |
АВ(IV) | + | + | + | - |
Агглютинация, образование "песка" в капле со смесью свидетельствуют о наличии группового антигена.
Методика определения групп крови с помощью цоликлонов анти-А и анти-В. Цоликлоны не являются клетками человеческих тканей, что исключает возможность инфекционного заражения
Определение групп крови системы АВО реагентами цоликлон производится в нативной крови, стабилизированной с помощью применяемых консервантов (глюгицир, цитроглюкофосфат, гепарин и др.); в крови, взятой из пальца; в крови, взятой без консерванта. Наиболее четкая реакция агглютинации наблюдается при использовании высокой концентрации эритроцитов.
Определение группы крови производится в помещении с хорошим освещением при температуре от +15° до +25°С. Реагенты не должны храниться открытыми, так как при высыхании активность антител снижается. Не следует пользоваться реагентами, если в них имеются нерастворимые хлопья или помутнение. Для каждого реагента используют свою маркированную (анти-А или анти-В) пипетку. Определение группы крови системы АВО производится обычными методами на белой фарфоровой или любой другой планшетке со смачиваемой поверхностью.
Определение производится в нативной крови, взятой в консервант; в крови, взятой без консерванта; в крови, взятой из пальца. Используется метод прямой гемагглютинации на плоскости: на пластине или планшете. Определение группы крови производится в помещении с хорошим освещением при температуре 15-25°С.
1.1. Нанесите на планшет или пластину индивидуальными пипетками Цоликлоны Анти-А, Анги-В и Анти-АВ по одной большой капле (0.1 мл) под соответствующими надписями.
1 2. Рядом с каплями антител нанесите по одной маленькой капле исследуемой крови (0,01-0,03 мл).
1.3. Смешайте кровь с реагентом,
1.4. Наблюдайте за ходом реакции с Цоликлонами визуально при легком покачивании пластины или планшета в течение 3 минут. Агглютинация эритроцитов с Цоликлонами обычно наступает в первые 3-5 сек, но наблюдение следует вести 3 мин ввиду более позднего появления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В.
1.5. Результат реакции а каждой капле может быть положительным или отрицательным. Положительный результат выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов. Агглютинаты видны невооруженным глазом в виде мелких красных агрегатов, быстро сливающихся в крупные хлопья. При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной а красный цвет, агглютинаты в ней не обнаруживаются.
1.6. Интерпретация результатов реакции агглютинации исследуемой крови с Цоликлонами представлена в таблице:
Результат реакции* с Цоликлоном Анти-А Анти-В Анти-АВ | Исследуемая кровь принадлежит к группе** | ||
¾ | ¾ | ¾ | 0(I) |
+ | ¾ | + | А(II) |
¾ | + | + | В(III) |
+ | + | + | AB(IV) |
* Знаком «+» обозначено наличие агглютинации, знаком «-» - отсутствие агглютинации
** Окончательно АВО принадлежность устанавливается по результатам перекрестного определения: антигенов А и В на эритрцитах и изогемагглютининов в сыворотке.
СИСТЕМА РЕЗУС - является второй после системы АВО, так как антигены системы резус обладают высокой иммуногенностью. Резус- несовместимость особенно опасна в акушерстве, у 28-35% беременных выкидыши, случаи мертворождений при резус - мамы и резус+ плода. 85% имеют резус+.
Выявление антигена возможно с помощью сывороток антирезус, получаемых из крови резус, иммунизированных резус- фактором или с помощью моноклональных антител (поликлонов).Поликлон антиД позволяет осуществить типирование крови в прямой реакции агглютинации на плоскости .Большую каплю реагента 0,1мл смешивают с небольшой каплей исследуемой крови 0,01мл ,резус+ даст «глыбки», еесли смесь гомогенна -это резус-.
Показания к переливанию:
абсолютные,если кровь нельзя заменить никакими другими методами лечения (острая массивная кровопотеря, анемия, травматический шок);
относительные, при которых переливание крови улучшают течение болезни, но при невозможности его осуществления может быть заменено другими методами лечения.
Наиболее часто показаниями к переливанию крови возникают при:
-острой кровопотери по принципу « объем в объем» в избежания снижения АД, уменьшения минутного объема крови, развития острой анемии и т.д.
-травматическом шоке для устранения нарушений микроциркуляции, восстановления ОЦК;
- анемии различного происхождения; - ожоговая болезнь;- острые хронические гнойные процессы; - отравление ядами; - истощение организма.
Противопоказания к переливанию крови:
-абсолютные - тяжелое поражение печень, почек, ОСН и ХСН, туберкулез, свежий ИМ.
-относительные- тромбоз и тромбофлебит, аневризма аорты, резко выраженная гипертоническая болезнь, аллергия, тяжелая форма ишемической болезни.