Методы определения вида и типа вирусов

Определение вида и типа вирусов в вируссодержащем материале производится путём нейтрализации вирусов специфическими сыворотками. Результат нейтрализации может быть установлен на основании следующих признаков:

1) нейтрализация ЦПД;

2) нейтрализация гемадсорбции;

3) задержка (торможение) гемагглютинации;

4) цветная проба;

5) свечение клеток, содержащих вирус, под влиянием специфических флюоресцирующих сывороток;

6) нейтрализация в опыте на животных (у опытных животных инфекция не развивается).

Возбудителями ОРВИ являются следующие вирусы:

РНК–содержащие вирусы.

1. Ортомиксовирусы (вирусы гриппа А, В, С).

2. Парамиксовирусы (парагриппозные вирусы, вирус эпидемического паротита, вирус Ньюкастла, вирус кори, респираторно-синцитиальный вирус).

3. Пикорнавирусы (более 110 серотипов риновирусов, некоторые серотипы вирусов Коксаки (А и В) и ЕСНО).

4. Реовирусы (3-й серотип).

5. Коронавирусы.

ДНК–содержащие вирусы.

6. Аденовирусы (из 41 серотипа 8 являются возбудителями ОРВИ).

Для диагностики ОРВИ применяются следующие методы:

1. Вирусологические – заражение культур клеток и куриных эмбрионов.

2. Иммунофлюоресцентный (метод ускоренной диагностики).

3. Серологические реакции – РТГА, РСК, ИФА.

4. Использование РНК–зондов.

Контрольные вопросы

Положение вирусов среди живых организмов, к какому царству они относятся? Основные особенности вирусов, присущие только им. Размеры вирусов (мелкие, средние, крупные), способы определения размеров вирусов. Как называется зрелая вирусная частица? Строение простых и сложных вирусов: типы симметрии, составные части вирусной частицы, внешняя оболочка; примеры простых и сложных вирусов. Принципы классификации вирусов. Назовите основные семейства, роды и виды РНК- и ДНК–содержащих патогенных вирусов. Методы культивирования вирусов. Виды культур тканей, их характеристика и способы получения. Питательные среды для выращивания культур тканей. Куриные эмбрионы: строение, методы и условия заражения куриных эмбрионов. Основные этапы репродукции вирусов в клетке. Методы обнаружения вирусов в культуре ткани. Что такое внутриклеточные включения? Что такое цитопатическое действие вирусов? Методы определения вида и типа вирусов. Как определить ЦПД вируса? Способы обнаружения вирусов в заражённом курином эмбрионе.

Перечислите основных возбудителей острых респираторных вирусных инфекций (ОРВИ). Вирус гриппа: к какому семейству вирусов относится; форма, тип симметрии, схема строения, особенности генома, антигены и серологическая реакция. По каким антигенам определяют тип и подтип вирусов гриппа? Антигенная изменчивость вируса гриппа. Методы диагностики, применяемые в первые дни заболевания и для ретроспективной диагностики. Реакция гемагглютинации, способ постановки. Реакция торможения гемагглютинации, что можно определить с помощью этой реакции (два варианта)? Какие диагностические препараты нужны для этого? Составьте схему реакции торможения гемагглютинации для определения типа и подтипа вируса гриппа. Специфическая профилактика и лечение гриппа, препараты и их характеристика.

Работа студента на практическом занятии

1. Изучение морфологии вирусов по таблицам, электронограммам и слайдам. Усвойте строение различных вирусов, особенности и биологическую роль отдельных структур вирионов.

2. Изучение морфологии элементарных телец Пашена. При микроскопии готового препарата найдите тельца Пашена, зарисуйте их, объясните, почему в данном случае вирусы видны в световом микроскопе.

3. Микроскопия и зарисовка нормальных и заражённых вирусом культур клеток. Изучите морфологию клеток культуры ткани, убедитесь в наличии одного слоя клеток, объясните преимущества однослойных культур. Сравните нормальную культуру клеток с культурой клеток, заражённых вирусом с наличием ЦПД. Изучите препарат гемадсорбции. Зарисуйте препараты.

4. Вирусологическая диагностика гриппа:

а) зарегистрируйте данные из сопроводительной записки в журнал;

б) поставьте реакцию гемагглютинации со смывом с носоглотки больного;

в) учтите результаты серологической диагностики гриппа (демонстрация): РТГА с парными сыворотками для обнаружения противогриппозных антител; РТГА для определения типа и подтипа вируса гриппа;

г) ускоренный метод диагностики гриппа с помощью иммунофлюоресценции (разбор и демонстрация).

5. Изучение препаратов, применяемых для диагностики лечения и специфической профилактики гриппа.