План изучения темы

Исходный уровень знаний

ЗАНЯТИЕ 26

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА АНАЭРОБНЫХ
ИНФЕКЦИЙ, ЗАБОЛЕВАНИЙ, ВЫЗВАННЫХ
ГРАМОТРИЦАТЕЛЬНЫМИ ПАЛОЧКОВИДНЫМИ
МИКРООРГАНИЗМАМИ (ПРОДОЛЖЕНИЕ), ДИФТЕРИИ

Хотя вызываемые анаэробами заболевания (столбняк, анаэробная газовая инфекция, ботулизм) встречаются сравнительно редко, лечение их представляет большие трудности, особенно при запоздалой диагностике. Поэтому важное значение приобретают профилактика и ранняя диагностика столбняка, анаэробной газовой инфекции и ботулизма.

В результате плановой специфической профилактики дифтерия в последние годы встречается в виде спорадических случаев. Однако наличие бактерионосительства и определённой прослойки неиммунизированных людей создает условия для возникновения отдельных случаев и даже вспышек дифтерии.

Цель самоподготовки

После самостоятельного изучения темы вы должны знать свойства возбудителей столбняка, ботулизма и дифтерии. Составьте схемы лабораторной диагностики этих заболеваний и усвойте методы их специфической профилактики и лечения. Обратите внимание на особенности исследований для обнаружения неспорообразующих анаэробов, а также особенности лабораторных исследований при смешанных инфекциях.

Восстановите в памяти методы культивирования и выделения чистых культур анаэробов, свойства экзотоксинов, особенности антитоксического иммунитета, получение и способы введения антитоксических гетерологичных сывороток для предупреждения аллергических реакций.

Цель занятия

1. Изучить принципы лабораторной диагностики инфекций, вызванных клостридиальными и неспорообразующими анаэробами.

2. Изучить принципы лабораторной диагностики инфекций, вызванных грамотрицательными палочковидными микроорганизмами.

3. Ознакомиться с возбудителем ботулизма, его морфологией, культуральными свойствами и факторами патогенности.

4. Изучить принципы лабораторной диагностики ботулизма.

5. Ознакомиться с возбудителями дифтерии, их морфологией, культуральными свойствами и факторами патогенности.

6. Изучить принципы лабораторной диагностики дифтерии.

7. Ознакомиться с набором иммунобиологических препаратов для диагностики, лечения и профилактики анаэробных инфекций и дифтерии.

1. Методы культивирования и выделения чистых культур анаэробов.

2. Характеристика возбудителей и лабораторная диагностика столбняка, анаэробной газовой инфекции.

3. Лабораторная диагностика заболеваний, вызываемых неспорообразующими анаэробами.

4. Характеристика аэробных грамотрицательных палочек и лабораторная диагностика гнойных и раневых инфекций, вызываемых этими бактериями.

5. Специфическая профилактика и лечение столбняка, анаэробной газовой инфекции.

6. Характеристика возбудителя ботулизма.

7. Характеристика возбудителей дифтерии.

Повторите по учебнику разделы: «Споры и спорообразование»; «Микробные токсины»; по руководству - методы культивирования и выделения чистых культур анаэробов. Обратите внимание на схемы микробиологических исследований при анаэробной газовой инфекции, столбняке, ботулизме.

После изучения темы студент должен уметь

1. Идентифицировать по культуральным свойствам P.aeruginosa и протей.

2. Проводить исследования при выделении возбудителя анаэробной газовой инфекции.

3. Классифицировать биологические препараты по теме занятия в соответствии с их назначением.

Контрольные вопросы

Перечислить методы культивирования анаэробов. Как создаются анаэробные условия при применении этих методов? Методы выделения чистой культуры анаэробов (назвать и описать). Какой материал нужно взять от больного с предполагаемым диагнозом «анаэробная газовая инфекция»? Опишите результаты, которые наблюдаются при посеве на соответствующие среды материала, содержащего Clostridium perfringens; через какой срок после посева нужно учитывать результаты? Какие препараты применяются для активной иммунизации против анаэробной газовой инфекции? В каких случаях проводится пассивная иммунизация против анаэробной газовой инфекции, какими препаратами, как они вводятся? Правила забора и пересылки в лабораторию материала от больного при подозрении на анаэробную инфекцию, вызванную неспорообразующими анаэробами. Культивирование неспорообразующих анаэробов: питательные среды, газовые смеси, длительность культивирования. Методы дифференцировки неспорообразующих анаэробов. Методы выделения и идентификации синегнойных палочек, протеев из гноя при раневой и гнойной инфекции. Характеристика возбудителя столбняка: название по-латыни, морфология (споры, жгутики, капсулы), отношение к окраске по Граму, способ биологического окисления, устойчивость спор, характер токсина: действие на организм, имеются ли серологические типы токсина. Столбняк у человека: механизм заражения, основной фактор патогенности. Методика обнаружения токсина в биологической пробе. Препараты для специфической профилактики и лечения. Плановая профилактика столбняка и профилактика столбняка по показаниям.

ЗАДАЧА. В больницу поступили два пациента, получившие травму (повреждение кожных покровов). При опросе выяснилось, что один из них, тракторист М., 22 лет, во время службы в армии получил плановые профилактические прививки, в том числе и против столбняка. Вторая пациентка, колхозница 50 лет, в последние 30 лет не прививалась против столбняка. Врач с целью профилактики столбняка назначил первому пациенту введение столбнячного анатоксина, второй – введение анатоксина и противостолбнячной сыворотки. Правильно ли сделал назначения врач? Почему в первом случае врач счёл возможным ограничиться введением анатоксина, а во втором назначил еще и сыворотку?

Характеристика возбудителя ботулизма: название, морфология, споры, жгутики, капсула, окраска по Граму, условия культивирования, гибнет ли при кипячении, характер токсина, серологические типы, отношение токсина к соляной кислоте и пищеварительным ферментам, к температуре 80⁰С и к высоким концентрациям хлористого натрия. Ботулизм у человека: вследствие чего возникает заболевание, при каких условиях это может произойти; основной фактор патогенности возбудителя, действие его в организме; какие материалы берут для лабораторного исследования, что обнаруживают в исследуемом материале? Опишите методы обнаружения ботулинического токсина в крови больного, в пищевом продукте, определение типа токсина. Препараты для активной иммунизации и лечения ботулизма; что они содержат, в каких единицах дозируются?

Характеристика возбудителя дифтерии: название по-латыни, морфология (форма, взаимное расположение клеток, споры, жгутики, капсула, включения), отношение к окраске по Граму, специальные методы окраски; способ биологического окисления, среды для культивирования, характер роста на свёрнутой сыворотке и теллуритовой среде, биологические типы. Дифтерийный токсин: действие на организм, единицы измерения силы токсина, получение антитоксина. Опишите методику определения токсиногенности дифтерийной культуры (реакция преципитации в агаре); наиболее частая локализация местного процесса при дифтерии. Какие материалы берут от больных, а также при исследовании на носительство дифтерийной палочки? Опишите по дням ход исследования и результаты, которые наблюдаются при выделении токсигенного возбудителя дифтерии: как формулируется ответ на разных этапах исследования? Опишите по дням ход исследования и результаты, которые наблюдаются при выделении нетоксигенной дифтерийной палочки. Методы дифференцировки истинных дифтерийных палочек и дифтероидов: морфология, биохимическая активность, пробы на уреазу и цистиназу по антигенной структуре и вирулентности. Иммунитет при дифтерии: характер иммунитета, методы определения напряжённости иммунитета, продолжительность иммунитета после плановых прививок. Специфическая профилактика дифтерии; какие препараты применяются, с какого возраста начинают прививки? Препарат для специфической терапии дифтерии; что содержит, как получен, в каких единицах дозируется, как вводится?

Задания для выполнения в процессе самоподготовки

Написать в дневнике название по-латыни возбудителя столбняка и схему введения гетерологичной сыворотки (по Безредке).

Работа студента на практическом занятии

1. Изучение морфологии грамотрицательных палочек и патогенных анаэробов. Промикроскопируйте и зарисуйте окрашенные по Граму препараты чистых культур синегнойной палочки, протея, возбудителей анаэробной газовой инфекции, столбняка и ботулизма. Название возбудителей под рисунками напишите по-латыни.

2. Изучение культуральных свойств синегнойной палочки и протея. Просмотрите готовые посевы синегнойной палочки и протея на скошенном агаре и в чашках Петри с МПА. Обратите внимание на пигмент синегнойной палочки и характер роста протея.

3. Ознакомление с аппаратурой для выращивания анаэробов. Посмотрите аппараты Аристовского, анаэростат, эксикатор, трубки Вейон-Виньяля, посев по Фортнеру, среду Китта-Тароцци. Устно опишите, как создаются анаэробные условия в этих аппаратах и средах.

4. Продолжение исследования отделяемого раны (2-й день). Изучите характер роста микробов на средах Китта-Тароцци, Вильсон-Блера, молоке. Приготовьте мазок из среды Китта-Тароцци, окрасьте по Граму, промикроскопируйте, зарисуйте. Сделайте посев по Вейнбергу для выделения чистой культуры. Опишите проделанную работу.

5. Усвоение схемы исследования материала от больных на наличие:

а) неспорообразующих анаэробов;

б) грамотрицательных палочковидных микроорганизмов (синегнойная палочка, протей, кишечная палочка).

Расскажите устно и запишите схему исследования в дневнике.

6. Усвоение по таблицам микробиологической диагностики столбняка. Расскажите устно и запишите схему исследования в дневнике.

7. По таблицам разберите схему исследования при ботулизме. Изучите демонстрационный набор препаратов для диагностики и лечения ботулизма.

8. Изучение диагностических, профилактических и лечебных препаратов, применяемых при раневых анаэробных инфекциях. Посмотрите препараты, прочитайте этикетки, охарактеризуйте каждый препарат по схеме, приведенной на предыдущем занятии.

9. Исследование слизи зева на носительство дифтерийной палочки. Возьмите стерильным тампоном слизь из зева друг у друга и посейте на свёрнутую сыворотку. В журнале запишите паспортные данные обследуемого студента и проделанную работу (1-й день).