Дополнительный материал к занятию

Идентификация культур сальмонелл при помощи
монорецепторных агглютинирующих сывороток

После изучения морфологии и ферментативной активности культуры, выделенной от больного, для окончательной идентификации необходимо изучение её антигенных свойств путём постановки реакции агглютинации с монорецепторными сальмонеллёзными сыворотками. Монорецепторной агглютинирующей сывороткой называется сыворотка, содержащая антитело (рецептор) по отношению к одному антигену. О-сыворотка, рецептор «4» содержит антитело к соматическому антигену сальмонелл 4; H-сыворотка «в» содержит антитело к жгутиковому антигену «в» (см. схему Кауфмана–Уайта). Для идентификации культуры сначала ставят реакцию агглютинации на стекле со смесью нескольких О-сывороток и при положительном результате агглютинации устанавливают принадлежность культуры к роду сальмонелл. После этого ставят реакцию агглютинации отдельно с каждой О-сывороткой, входившей в смесь, чтобы установить серологическую группу. Определив групповую принадлежность культуры, ставят реакцию агглютинации с видовыми Н-сыворотками и, таким образом, определяют вид выделенной культуры сальмонелл.

Контрольные вопросы

Как используется реакция агглютинации для определения вида микроба? Что такое монорецепторные сыворотки и как их получают? Как производится идентификация сальмонелл по антигенной структуре с помощью монорецепторных сывороток? Как и с какой целью проводят фаготипирование брюшнотифозных палочек? Характеристика Vi-антигена брюшнотифозных палочек. Дать определение понятий «пищевая токсикоинфекция» и «пищевая интоксикация». Перечислите виды сальмонелл, которые чаще всего являются причиной пищевых токсикоинфекций – сальмонеллёзных гастроэнтеритов. Условия, определяющие возможность возникновения пищевых токсикоинфекций. Схема микробиологического исследования при пищевой токсикоинфекции сальмонеллезной этиологии: материалы для исследования, питательные среды, идентификация возбудителя, серологические исследования. Какие виды сальмонелл вызывают внутрибольничные инфекции? Какими свойствами обладают внутрибольничные штаммы сальмонелл? Особенности диагностики внутрибольничных сальмонеллёзов. Схемы исследования испражнений на обнаружение возбудителей бактериальной дизентерии. Принцип антигенной классификации кишечных палочек, антигены и их расположение в клетке. Категории диареегенных кишечных палочек. Характеристика представителей разных категорий. Серотипы кишечных палочек, наиболее часто вызывающие коли-инфекцию. Схема исследований на возбудителей коли–инфекции. Описать результаты по дням при выделении возбудителей коли-инфекции.

Работа студента на практическом занятии

1. Продолжение исследования на гемокультуру. Отберите изолированную лактозоотрицательную колонию на среде Эндо и пересейте её на среду Олькеницкого (демонстрация). Запишите в журнал проделанную работу.

2. Продолжение исследования на копрокультуру. Учтите результат посева на среду Олькеницкого: сбраживание лактозы, глюкозы, газообразование, сероводород. Поставьте реакцию агглютинации на стекле выросшей культуры с монорецепторными сыворотками. Сформулируйте ответ. Опишите результаты проделанной работы в графе «Ход исследования», а окончательный ответ – в графе «Результат». Изучите демонстрационный набор агглютинирующих сывороток.

3. По таблицам разберите схему исследования при пищевой токсикоинфекции сальмонеллёзной этиологии.

4. Продолжение исследования на бактериальную дизентерию. Изучите колонии, выросшие на среде Плоскирева, отберите изолированную лактозонегативную колонию и проведите реакцию агглютинации на стекле с сыворотками Флекснер и Зонне. Запишите в журнал проделанную работу, а в графе «Результат» - предварительный результат, в графе «Примечания» - что необходимо сделать для получения окончательного ответа.

5. Продолжение исследования на коли–инфекцию. Изучите колонии, выросшие на среде Эндо. Отберите изолированные лактозоположительные колонии, поставьте реакцию агглютинации на стекле с комплексной сывороткой материала из нескольких колоний до положительного результата (до 10 колоний). Колонию, давшую положительный результат, пересейте на скошенный агар. Запишите в журнал проделанную работу. Изучите демонстрационные препараты агглютинирующих сывороток для диагностики коли–инфекции.

5. Изучите ферментативные свойства энтеробактерий по демонстрационным микротест-системам для биохимической идентификации энтеробактерий.