КАРИОТИП ЧЕЛОВЕКА
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПОЛОВОГО ХРОМАТИНА В СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКЕ ПОЛОСТИ РТА.
На уровне 2-х коренных зубов штапелем делается соскоб со слизистой оболочки полости рта. Соскоб наносится на предметное стекло, делается мазок. На мазок наносится капля краски (ацето-орсеин) покрывается покровным стеклом. Препарат “давленный”, для чего покровное стекло нажимают кулаком. Препарат парафинируют, смотрят под микроскопом. За Х-хроматин принимается хроматин, который находится на границе ядерной оболочки и ядра.
“БАРАБАННЫЕ ПАЛОЧКИ”.
В мазке крови найти сегментированный лейкоцит. Внимательно рассмотреть его, отметка присутствия или отсутствия “барабанных палочек”.
Показания к исследованию полового хроматина.
Состояния | Х- хроматин | У- хроматин |
1. Пренатальная диагностика пола. | + | + |
2. Неясен пол новорожденного. | + | + |
3. Недифференцированная олигофрения. | + | + |
4. Первичная аменорея. | + | - |
5. Нарушение менструального цикла | + | + |
.6. Бесплодие у мужчин. | + | + |
Хромосомы, как индивидуальные структуры становятся доступными в период деления клетки в результате значительного укорочения и утолщения. наиболее удобной для изучения является стадия метафазы. На этой стадии митозы отчётливо видно, что диплоидный набор хромосом человека состоит из 46 хромосом: 22 аутосом и одной пары половых хромосом (ХХ у женщин и ХУ у мужчины). Гомологичные хромосомы, как правило сходны в размерах и строении.
Система обозначения хромосом была введена в 1960 году специальной высшей комиссией, собравшейся в г. Денвере, в университете штата Колорадо (США). Результаты были опубликованы в виде документа, обозначенного как “стандартная система номенклатуры митотических хромосом человека”.
Согласно этому документу термин “кариотип” рекомендуется применять к систематизированному набору Х единичной клетки, выполненному с помощью рисунка или путем вырезания хромосом из микрофотографии. При этом имеется виду, что хромосомы данной клетки типичны для индивидуума.
Термин “идиограмма” сохраняется для представления кариотипа в виде схемы, построенной на основании измерения хромосом нескольких клеток. Хромосомы пронумерованы от 1 до 22 в соответствии с их длинной, а также с другими особенностями их строения (перетяжка).
В настоящее время применяется как дифференциальное окрашивание хромосом, идентификация которых проводится по Парижской номенклатуре (1971).
Для составления кариотипа используется “касса” из полиэтиленовой пленки, в которую раскладывают вырезанные из микрофотографии хромосомы. На I линии размещаются хромосомы групп А и В (1-6) на II-й линии хромосомы группы С (6-12), на III-ей линии - хромосомы группы Д и Е (13-18) и т.д.
22 аутосомы располагают в 7 группах, различия между которыми легко определить. Правильно составленный кариотип позволяет установить пол исследуемого человека и отклонения от нормы (число хромосом больше или меньше 46).
Ниже приводится классификация хромосом, составленная на основе Денверской и Лондонской конференций.
Группа А (хромосомы 1-3). Крупные метацентрические хромосомы с почти медиальными центромерами в хромосомах 1 и З и субмедианной - в хромосоме 2. Эти З хромосомы хорошо отличаются одна от другой размерами ‘и положением центромеры.
Группа В (хромосомы 4-5). Крупные метацентрические хромосомы с субмедианными центромерами. Две хромосомы трудно различаются между собой, но вторая намного длиннее.
Группа С (хромосомы 6-12). Субметацентрические хромосомы средних размеров субмедианными центромерами. Эта большая группа хромосом представляет наибольшие трудности для идентификации отдельных хромосом.
Группа Д (хромосомы 13-15). Средних размеров акроцентрические хромосомы. Между собой довольно трудно различимы.
Группа Е (хромосомы 16-18). Довольно короткие субметацентрические хромосомы с почти медианным (16-ая), субмедианным (17-ая) и субакроцентрическими (18-ая) центромерами.
Группа F (хромосомы 19-20). короткие метацентрические хромосомы с медианным центромерами. Между собой неразличимы.
Группа G (хромосомы 21-22). Очень короткие акроцентрические хромосомы. Короткое плечо обладает способностью формировать спутник. Он выявляется не во всех клетках и не у всех индивидуумов. Между собой эти две хромосомы неразличимы.
Х-хромосомы. Сходны с самыми длинными хромосомами группы С, в особенности с хромосомой 6, от которой её трудно отличить.
Y- хромосомы. Маленькая акроцентрическая хромосома. По размерам и форме сходна с хромасомами 21 и 22, но не имеет спутника.