Мікроскопічне дослідження мокротиння: морфологія елементів мокротиння та діагностичне значення їх виявлення
Для мікроскопічного дослідження мокротиння перш за все використовують нативні препарати. Повноцінність дослідження залежить від правильного виготовлення та кількості переглянутих нативних препаратів. Для виготовлення нативних препаратів (не менше 2-3) вибирають з мокротиння всі підозрілі шматочки й утворення, які відрізняються від слизу, та домішки і переносять їх на предметне скло, накривають покривним скельцем. Препарат має бути тонким і не виходити за межі покривного скельця.
Елементи мікроскопії мокротиння поділяються на чотири групи: клітинні, волокнисті, кристалічні та флора.
Клітинні елементи.
Лейкоцити– клітини круглої форми, розміром 10-15 мкм, зернисті –нейтрофіли. Постійно виявляються в мокротинні, в слизистому –поодинокі в полі зору, а в гнійному або слизисто-гнійному –суцільно вкривають поле зору.
Еозинофіли – клітини круглої форми темніші за забарвленням, ніж нейтрофіли, мають у цитоплазмі густі, чіткі, що заломлюють світло, гранули й трапляються в мокротинні в разі бронхіальній астми та інших алергічних захворювань.
Еритроцити – круглі клітини зелено-жовтого кольору, діаметром менші ніж лейкоцити, без зернистості (незмінені еритроцити). Поодинокі еритроцити постійно виявляються в мокротинні. Наявність їх у великій кількості характерна длякров'янистого мокротиння. Під впливом гнилісних процесів еритроцити руйнуються й розрізнити їх неможливо – у таких випадках необхідно провести реакцію на "приховану" кров.
Плоский епітелій має вигляд плоских безбарвних клітин, у 10 разів більших за лейкоцити; має округлу або полігональну форму й невелике кругле ядро, розташоване в центрі клітин. Це злущений епітелій слизової оболонки ротової порожнини та носоглотки. Поодинокі клітини плоского епітелію також завжди виявляють у мокротинні, у великій кількості – якщо до мокротиння домішується слина, тому діагностичного значення не мають.
Циліндричний війчастий епітелій має вигляд видовжених клітин, розширених на одному кінці й звужених на іншому (форма келиха). На розширеному кінці клітини розміщені війки, а в звуженому кінці – овальне ядро. Розміщуються ці клітини групами, а в свіжому матеріалі можна спостерігати активний рух війок. Дуже часто циліндричний епітелій видозмінюється: втрачає війки, змінюється форма клітини (стає трикутною, веретеноподібною, круглою).
Виявлення в мокротинні циліндричного війчастого епітелію, що вистилає слизову оболонку трахеї та бронхів, свідчить про ураження відповідних органів дихальної системи (бронхіальна астма, бронхіт, трахеїт тощо).
Альвеолярні макрофаги – клітини ретикуло-гістіоцитарного походження, вільно рухаються до вогнища запалення й здатні до фагоцитозу. Мають овальну або круглу форму, розміром удвічі – втричі більші, ніж лейкоцити, ядро розміщене ексцентрично бобоподібної або круглої форми, в цитоплазмі містяться включення (фагоцитовані частинки темно-бурого кольору). Макрофаги фагоцитують частинки пилу, лейкоцити, еритроцити, бактерії тощо. У разі хронічних запальних процесів нерідко зазнають жирового переродження. Цитоплазма таких клітин заповнена краплями жиру (зернисті кулі).
Альвеолярні макрофаги трапляються в мокротинні у вигляді скупчень у разіпневмонії, бронхітів, професійних захворювань легень,а також у курців.Макрофаги виявлено також при новоутвореннях, актиномікозі, туберкульозі легенів.
Сидерофаги– це альвеолярні макрофаги, що містять гемосидерин у вигляді включень золотисто-жовтого кольору. Щоб віддиференціювати сидерофаги від альвеолярних макрофагів, що містять частинки пилу й нікотину, треба зробити реакцію на берлінську лазур, яка в сиде-рофагах є позитивною (гемосидерин, що міститься в сидерофагах забарвлюється в синій або синьо-зелений колір).
Пухлинні атипові клітини виявляють у мокротинні в разі новоутворень у легенях і бронхах. Ознаками злоякісності клітин є поліморфізм їх розмірів, порушення ядерно-цитоплазматичного співвідношення в бік збільшення ядра, наявність гіперхромних ядер; зміна форми ядра, наявність в ньому ядерець неправильної форми, мітоз клітин. Розташовуються ці клітини окремо або у вигляді скупчень (комплексів) без чітких меж. Поліморфізм розмірів клітини та форм ядер, безладне розміщення клітин в комплексі є характерною ознакою злоякісності.
Волокнисті утворення.
Еластичні волокна є елементами сполучної тканини, їх виявляють у мокротинні в разі таких паталогічних процесів, коли руйнується легенева тканина(абсцес легенів, туберкульоз, новоутвореннятощо). Виявлення еластичних волокон має діагностичне значення для диференціації абсцесу легені від гангренозного процесу.
Еластичні волокна в нативному препараті мають вигляд блискучих, двоконтурних, волокнистих ниток, що іноді складаються в пучки, дуже часто вони повторюють будову альвеол. У разі туберкульозу легенів в скупченнях і обривках еластичних волокон виявляють мікобактерії туберкульозу.
Коралоподібні волокна в мокротинні характерні для таких хронічних захворювань легень яккавернозний туберкульоз. У порожнині каверни еластичні волокна вкриваються жирними кислотами й лугами і стають грубішими, мають горбисті потовщення, нагадують морськікорали.
Звапнілі волокна– це еластичні волокна, що просякнуті солями вапна. Вони втрачають свою еластичність, стають крихкими, ламкими й набувають вигляду пунктирної лінії, яка складається з окремих, сіруватих паличок, що заломлюють світло. Виявляють в мокротинні в аморфній масі солей вапна та крапель жиру, що вказує на наявність в легеняхзвапнілого казеозного розпаду, що характерно длятуберкульозу легенів.
Тетрада Ерліха– це елементи розпаду, що потрапляють у мокротиння із звапнованого первинного туберкульозного вогнища. До складу тетради Ерліха входять чотири елементи: 1) звапнілі еластичні волокна; 2) звапнілий казеозний детрит; 3) кристали холестерину; 4) мікобактерії туберкульозу.
Спіралі Куршмана– штопороподібні слизисті утворення, що складаються з осьової частини – блискучої товстої звивистої центральної нитки, огорненої мантією – рідким слизом.
Спіралі Куршмана розглядають за малого збільшення мікроскопа. Під час дослідження за великого збільшення по периферії спіралі можна бачити еозинофіли, клітини циліндричного епітелію, кристали Шарко-Лейдена. Спіралі Куршмана виявляють в мокротинні в разі захворювань дихальних шляхів, що супроводжуються бронхоспазмом (бронхіальна астма, астмоїдний бронхіт, пухлини бронхів.
Кристалічні утворення.
Кристали Шарко-Лейдена мають вигляд безбарвних, прозорих витягнутих ромбів різної величини. Як правило, виявляють у мокротинні, що містить еозинофіли. Утворення кристалів Шарко-Лейдена пов'язують з розпадом еозинофілів, тому дуже часто свіжовиділене мокротиння цих кристалів не містить, вони утворюються в ньому через 24-48 год їх наявність в мокротинні характерна длябронхіальної астми. Крім того, вони зустрічаються в разіеозинофільних бронхітів, глистних уражень легенів.
Кристали гематоїдину мають форму ромбів, зірок, голок, що збираються в пучки золотисто-жовтого кольору. Вони утворюються внаслідок розпаду гемоглобіну в безкисневому середовищі (крововилив у некротизовані тканини). У препаратах мокротиння розміщуються на тлі детриту та еластичних волокон, що свідчить пророзпад легеневої тканини.
Кристали гематоїдину слід відрізняти від зерен гемосидерину –золотисто-жовтих включень в цитоплазмі альвеолярних макрофагів.
Кристали холестерину мають вигляд безбарвних прямокутників з вирізаними кутами або східцеподібними виступами; розташовуються окремо або нашаровуються один на одного. Утворюються внаслідок розпаду жироперероджених клітин, затримки мокротиння в порожнинах і розміщуються на тлі детриту. Кристали холестерину виявляють в мокротинні в разігнійних процесів у легенях (абсцес), туберкульозу, новоутворень.
Кристали жирних кислот мають вигляд сіруватих голчастих утворень, розміщених на тлі детриту й бактерій; утворюються в разі застою мокротиння в порожнинах. Виявляють кристали жирних кислот при абсцесі легенів, бронхоектазі, туберкульозі.
Флора.
Мікрофлора. У забарвлених препаратах мокротиння виявляють різні мікроорганізми, які в невеликій кількості завжди наявні в дихальних шляхах здорової людини. За особливо несприятливих умов (переохолодження організму, зниження опірності) ця флора посилено розмножується, стає патогенною і спричинює захворювання.
Найважливіше діагностичне значення має виявлення в мокротинні мікобактерій туберкульозу, які є збудниками туберкульозу легенів. Мікобактерії туберкульозу – кислото- та спиртостійкі мікроорганізми, тому спосіб фарбування препарату за Цілем-Нільсеном дає змогу виявити й віддиференціювати їх від інших мікроорганізмів. За Цілем-Нільсеном мікобактерії туберкульозу забарвлюються фуксином у червоний колір (тонкі, злегка вигнуті палички різної довжини з потовщеннями на кінцях або посередині, розміщуються групами або поодинці), а всі інші мікроорганізми мають блакитно-синє забарвлення.
У мокротинні можна виявити такі мікроорганізми: стрептококи, стафілококи, пневмококи, клебсієли в забарвленихза Грамом препаратах. Бактеріоскопічне дослідження мокротиння має лише орієнтовне значення. Остаточне заключення про збудника цього захворювання можна зробити завдяки бактеріологічному дослідженню: посів мокротиння на живильні середовища та одержання чистої культури.
Грибкова флора. У разі грибкових уражень легенів в мокротинні можна виявити збудників захворювання. Актиномікоз легенів спричинює променистий гриб – актиноміцет. У гнійно-кров'янистому мокротинні виявляють друзи цього мікроорганізма. Мікроскопічно – це округлі сплетіння ниток міцелію, які закінчуються колбоподібними утвореннями
У разі тривалого лікування антибіотиками можуть виникнутикандидозні пневмонії, які супроводжуються виділенням слизисто-гнійного, іноді кров'янистого мокротиння. Ці ураження спричинюють дріжджові гриби роду Candida. Під час мікроскопічного дослідження дріжджові гриби виявляють у вигляді безбарвних спор, що брунькуються, розміщених скупченнями, і ниток міцелію.
Пліснявий гриб роду Aspergillus має вигляд обривків широких ниток міцелію та круглих темно-зелених спор.