ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУППЫ КРОВИ ДВОЙНОЙ РЕАКЦИЕЙ
Оценка результатов
Стандартные сыворотки трех групп не вызывают агглютинации эритроцитов во всех лунках - группа крови О (I) первая;
Стандартные сыворотки О (I) и В (III) группы агглютинировали эритроциты в первой и третьей лунках, а не агглютинировали во второй - группа крови А (II) вторая;
Наличии агглютинации в первой и второй лунках и отсутствии в третьей - группа В (III) третья;
Стандартные сыворотки всех трех групп агглютинировали эритроциты во всех лунках - данная кровь относится к четвертой группе АВ(IV). Если исследуемая кровь оказалась АВ(IV), группы проводится дополнительное контрольное исследование со стандартной сывороткой АВ(IV) группы. При отсутствии агглютинации исследуемой крови с сывороткой АВ(IV) группы данную кровь можно отнести к четвертой группе.
Примечание: Во всех сомнительных случаях необходимо провести повторное исследование с гемагглютинирующими сыворотками другой серии.
(ПО СТАНДАРТНЫМ СЫВОРОТКАМ И СТАНДАРТНЫМ ЭРИТРОЦИТАМ) (перекрестный способ)
Суть метода – с помощью стандартных изогемагглютинирующих сывороток определяется наличие или отсутствие в исследуемой крови групповых антигенов А и В, а с помощью стандартных эритроцитов наличие или отсутствие в плазме групповых антител α и β. Стандартные эритроциты представляют собой 10-20 % взвесь эритроцитов 0(I), A(II) и B(III) групп в цитратно-физиологическом растворе. Их готовят из крови доноров с заранее известной группой крови, хранят при +4-8°С. Срок годности 2-3 дня.
Материальное оснащение: стандартные сыворотки 0(I), А(II), В(III), групп двух серий, стандартные эритроциты 0(I), А(II), В(III) групп, изотонический раствор хлорида натрия, иглы, тарелки, стеклянные палочки или предметные стекла, пипетки, песочные часы, резиновые перчатки, маска, очки, клеенчатый передник.
Методика выполнения:
1. Надеть маску и передник, обработать руки антисептиком для обработки рук, надеть перчатки и защитные очки.
2. Взять 3-5 мл исследуемой крови в пробирку без стабилизатора. Кровь должна отстояться, или ее центрифугируют для получения сыворотки.
3. На планшет нанести по две капли стандартных сывороток группы 0(I), А(II), В(III), двух серий.
4. Соответственно каждой группе сывороток расположить по одной капле стандартных эритроцитов группы 0(I), А(II), В(III), .
5. В стандартные сыворотки добавить по одной капле испытуемой крови, а в стандартные эритроциты - по две капли испытуемой сыворотки.
6. Капли перемешать углом предметного стекла, всякий раз изменяя угол так, чтобы не произошло смешивание разных сывороток и разных эритроцитов.
7. Покачивая планшет в руках в течение 5 минут, следят за наступлением агглютинации.
Оценка результатов:
При трактовке результатов оценивают данные, полученные при обеих реакциях (со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и стандартными эритроцитами)
1. Эритроциты группы О (I) являются контрольными, агглютинация с ними не происходит.
2. Агглютинация со стандартными эритроцитами А и В и нет агглютинации в трех стандартных сыворотках двух серий - в исследуемой сыворотке присутствуют оба агглютинина a и b, а в испытуемых эритроцитах нет агглютиногенов, т. е. кровь относится к группе O(I).
3. Агглютинация со стандартными эритроцитами группы B(III) и со стандартной сывороткой группы O(I), B(III) - в исследуемых эритроцитах имеется агглютиноген А, а в сыворотке исследуемой крови - агглютинин b. Следовательно, кровь относится к группе A(II).
4. Агглютинация со стандартными эритроцитами группы A(II) и со стандартной сывороткой группы A(II), O(I) – в исследуемых эритроцитах имеется агглютиноген В, а в исследуемой сыворотке - агглютинин a. Следовательно, кровь относится к группе B(III).
5. Нет агглютинации со стандартными эритроцитами и есть агглютинация со стандартными сыворотками - в исследуемых эритроцитах имеются оба агглютиногена А и В, а в сыворотке исследуемой крови отсутствуют оба агглютинина, кровь относится к группе AB(IV).
Примечание.Результат перекрестного способа считается достоверным только в случае совпадения ответов о группе исследуемой крови и со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и со стандартными эритроцитами. При несовпадении результатов обе реакции необходимо переделать.