Практичне заняття №19

Питання для самоконтролю.

 

· Які біологічні моделі можна використати для постановки реакції нейтралізації вірусів?

· Які особливості серологічної діагностики вірусних захворювань?

· З якою метою при серологічній діагностиці вірусних інфекцій беруться парні сироватки?

· Особливості постановки реакції зв’язування комплементу при вірусних інфекціях.

· Що таке гемолітична сироватка та як її отримують.

· Що таке гемолітична система?

· Які додаткові контролі потрібно поставити при постановці реакції зв’язування комплементу у вірусології.

 

 

Тема: «Ортоміксовіруси. Лабораторна діагностика грипу»

 

1. Актуальність теми.

Через широке розповсюдження та високий рівень захворюваності, грип та гострі респіраторні інфекції продовжують залишатись актуальною проблемою системи охорони здоров’я України. Щороку на них хворіють понад 13-20 млн осіб, що складає понад 90 % усіх зареєстрованих інфекцій.

Своєрідність структури та генетики збудників грипу, їх широке розповсюдження не лише серед людей, а й серед тварин, здатність до інтенсивної мінливості і, як наслідок, виникнення тяжких грипозних епідемій та пандемій – все це обумовлює наукову та практичну важливість усіх питань, пов’язаних з грипом. Внаслідок нових екологічних та соціально-економічних умов, забруднення навколишнього середовища, глобального потепління змінюється коло природних хазяїв збудників грипу, контакти між ними, формується підґрунтя для виникнення нових типів грипозних вірусів. Є абсолютно реальна загроза появи пандемічного штаму збудника при рекомбінації вірусів грипу людини та птахів. Наслідки такої пандемії можуть бути катастрофічними у глобальному масштабі. Все це свідчить про актуальність теми заняття та спрямовано на формування позитивної мотивації її вивчення.

2. Конкретні цілі:

· Засвоїти біологічні властивості вірусів грипу.

· Оволодіти методами вірусологічної та серологічної діагностики грипу.

· Аналізувати основні сучасні підходи до лікування та профілактики грипу.

3. Базові знання, вміння, навички, необхідні для вивчення теми (міждисциплінарна інтеграція). Дивись практичне заняття №16.

4. Завдання для самостійної роботи під час підготовки до заняття.

4.1. Перелік основних термінів, параметрів, характеристик, які повинен засвоїти студент при підготовці до заняття.

Термін Визначення
Вірусні глікопротеїни   Вірусні глікопротеїни – структурні поверхневі білки зовнішніх оболонок складних вірусів, які складаються із зовнішньої (гідрофільної) частини, що містить на кінці аміногрупу (N -кінець), і занурену у ліпідний шар гідрофобну частину, остання містить на зануреному кінці гідроксильну групу (С-кінець). Вірусні
  глікопротеїни є специфічними антигенами. Основною функцією вірусних глікопротеїнів є взаємодія із специфічними рецепторами поверхні клітин, тобто специфічна адсорбція вірусу на клітинах. Іншою їх функцією є участь у злитті вірусної ї клітинної мембран, що призводить до проникнення вірусів у клітину та роздягання (вивільнення геномів).
Антигенний шифт Антигенний шифт це така мінливість вірусу грипу, яка призводить до появи штамів із зовсім новими поверхневими глікопротеїнами, тобто супроводжується радикальним оновленням антигенів збудника.
Антигенний дрейф Антигенний дрейф – часткові зміни певного гемаглютиніну, при якому відбувається заміна однієї або декількох амінокислот внаслідок точкових мутацій, що призводить до появи штамів з незначно оновленими антигенними властивостями.
Вірусна популяція Вірусна популяція – віруси окремого виду, що походять з однієї вірусної частки репродукуються в природній або експериментальній чутливій системі і утворюють в ній необмежену кількість генерацій.
Адаптація вірусу Адаптація вірусу - здатність вірусу інтенсивно розмножуватися в культурі клітин нового господаря або при зміні умов культивування.

4.2. Теоретичні питання до заняття:

· Загальна характеристика і класифікація ортоміксовірусів. Класифікація вірусів грипу людини.

· Загальна характеристика вірусів грипу: структура та особливості геному, хімічний склад та антигенна будова.

· Резистентність вірусів грипу, чутливість до фізичних та хімічних факторів.

· Методи культивування ортоміксовірусів.

· Джерело інфекції та механізм передачі грипу.

· Патогенез грипу, роль персистенції вірусу в організмі людини і тварин у збереженні епідемічно значущих штамів.

· Особливості лабораторної діагностики грипу.

· Основи специфічної профілактики і лікування грипу.

 

4.3. Практичні завдання, які виконуються на занятті:

1. Засвоїти схему вірусологічної діагностики грипу. Здійснити облік РГА з метою вивчення і визначення титру вірусу, а також облік РГГА з метою серологічної ідентифікації вірусів грипу, зробити висновок.

2. Здійснити постановку РГГА з метою серологічної діагностики грипу, оцінити результати і зробити висновки.

3. Ознайомитись з діагностичними, профілактичними і лікувальними препаратами, які використовуються при грипі.

 

5. Зміст теми.

На практичному занятті студенти вивчають морфологічні, фізико-хімічні властивості, ультраструктуру та антигенну будову представників родини Ortomyxoviridae, види та механізми антигенної мінливості.

Складаючи схему лабораторної діагностики, студенти використовують набуті знання під час самостійної підготовки та в процесі розгляду теми на занятті. Проводять облік реакцій та надають їм оцінку (визначають наявність вірусу в РГА, проводять облік РГГА, поставленої з метою серологічної ідентифікації вірусів грипу, здійснюють облік РГГА, поставленої з метою серологічної діагностики грипу). Ознайомлюються та вносять до протоколу назву препаратів, які використовуються для лабораторної діагностики та профілактики грипу: грипозні діагностикуми, діагностичні сироватки, вакцини: живі, інактивовані (цільновіріонні), хімічні (спліт - вакцини, субодиничні), імуноглобулін людини нормальний, різні види інтерферону.

Виконані завдання студенти записують у протокол та підписують його у викладача.

Рекомендації для оформлення протоколу

Завдання 1.Ознайомитись зі схемою лабораторної діагностики грипу.

Схема лабораторної діагностики грипу

Завдання №2. Здійснити облік РГА з метою виявлення вірусу з гемаглютинуючими властивостями.

 

 

Завдання 3. Здійснити облік РГГА, поставленої з метою серологічної ідентифікації та серологічної діагностики гриппу (схему див. заняття №18).

 

Завдання 4. Вивчити препарати для специфічної профілактики грипу.

1. Вакцина грипозна алантоїсна жива суха для інтраназального введення. (1 покоління вакцин) (Росія).

2. Очищена інактивована спліт-вакцина для профілактики грипу „Ваксігрип” (Франція).

3. Інактивована субодинична вакцина „Інфлувак” (Нідерланди).