Сравнительная характеристика вирусных гепатитов

Гепатиты А (HAV) B (HBV) С (НСV) D (HDV) Е (НЕV) G (HGV)
Таксономия возбудителя Сем. Picornaviridae Род. Hepatovirus Сем. Hepadnaviridae Род. Ortohepadnavirus Сем. Flaviviridae Род. Hepacivirus Неклассифицирован, вирус-сателлит (вироид) HBV Сем. Hepeviridae Род. Hepavirus Сем. Flaviviridae неклассифицирован,
Морфология (форма, размер, наличие суперкапсида) простой вирус, капсид икосаэдр 25-30 нм сложный вируссферической и палочковидной формы 42 нм сложный вирус сферической формы 55-65 нм сложный вирус сферической формы 35-40 нм. простой вирус икосаэдр 27-34нм сложный вирус сферической формы 60 нм
Геном + РHK, линейная, нефрагментированная ДНК кольцевая, двунитевая с однонитевым участком + РHK, линейная, нефрагментированная - РHK, кольцевая + РHK, линейная, нефрагментированная + РHK, линейная, нефрагментрованная
Пути передачи Фекально-оральный Парентеральный Парентеральный Парентеральный Фекально-оральный Парентеральный
Инкубацион-ный период 14-45 дней 2- 6 месяцев 14 дней - 3 месяца 2 - 6 месяцев 14-45 дней 14 дней - 6 месяцев
Клинические проявления Острые гепатиты Часто хронический гепатит, цирроз, нередко рак Часто хронический гепатит, цирроз, часто рак Часто хронический гепатит, цирроз, нередко рак Острые гепатиты, тяжело протекают у беременных Часто хронический гепатит
Специфичес-кая профилак-тика Инактивированная культуральная по эпид. с 3 лет, ревакцинация через 4 года Рекомбинантная, плановая с 1996 года. 12час, 1месяц,3 месяца ревакцинация через 5 лет Нет Вакцина против гепатита В из-за общности поверхностного HBsAg Инактивированная культуральная по эпид. с 3 лет. Нет
Исследуемый материал сыворотка крови, фекалии, вода и пищевые продукты. сыворотка крови, биоптаты печени сыворотка крови, биоптаты печени сыворотка крови, биоптаты печени сыворотка крови, фекалии, вода и пищевые продукты сыворотка крови, биоптаты печени
Маркеры HAV РНК, HAV Ag, anti-HAV IgM, IgG HBV ДНК, HBsAg, HBeAg, anti-HBsAg, anti-HBeAg, anti-HBc IgM, IgG HCV РНК, anti-HCV IgM, anti-HCV IgG HDV РНК, HDAg, anti-HDV IgM, IgG HEV PНК, HEV Ag, anti-HEV IgM, IgG, HGV РНК, anti-HGV
Экспресс-диагностика 1) ПЦР - РНК вируса (HAVRNA) выявляют в сыворотке крови, фекалиях, воде и пищевых продуктах. 2) ИФА - антиген вируса (HAVAg) выявляют в экстрактах фекалий; 3) Иммунная электрон-ная микроскопия (ИЭМ). 1) ПЦР, метод молекулярной гибридизации - ДНК вируса (HBV DNA) в крови, биоптатах печени. 2) ИФА, РПГА в сыворотке крови определяют антигены вируса : поверхностный антиген (HВsAg), “антиген инфекционности” (HВеAg); ПЦР, метод молекулярной гибридизации в сыворотке крови - РНК вируса (HCV RNA)2) 1) ПЦР, и метод молекулярной гибридизации - РНК вируса (HDV RNA) ; 2) ИФА, РИА, иммуноблотинг -антиген вируса (HDV Ag) .   1) ПЦР обнаружение РНК вируса (HEV RNA) в сыворотке крови, испражнениях 2) ИФА - антиген вируса (HЕVAg), ПЦР с предварительным этапом обратной транскрипции (RT-PCR)обнаружение РНК вируса (HGV RNA) ;
Вирусологичес-кие методы Заражение клеточных культур, обезьян (шимпанзе) только для научных и производственных целей, в диагностике не применяют Заражение обезьян (шимпанзе) только для научных целей, в диагностике не применяют Нет Нет Нет Нет
Серологическаядиагностика ИФА, РИА в сыворотке крови выявляют Ig M-антитела (анти-HAV IgM) и Ig G-антитела (анти-HAV IgG). ИФА, РПГА в сыворотке крови определяют противовирусные антитела: антитела к поверхностному антигену (анти-HВsAg); антитела к сердцевинному антигену (анти-HВсAg IgM, IgG; антитела к “антигену инфекционности” (анти-HВеAg); ИФА,в сыворотке антитела к вирусу (анти-HCV IgM, анти-HCV IgG) В донорской крови 1) ИФА с раздельным определением антител к различным белкам вируса, 2) иммуноблоттинг с рекомбинантными антигенами к белкам капсида (С22) и функциональным белкам (NS3-NS5) для выявления антител. ИФА в сыворотке крови- антитела к вирусу (анти-HDV IgM, анти-HDV IgG).   ИФА в сыворотке крови- антитела к вирусу (анти-HЕV IgM, анти-HЕV IgG ИФА в сыворотке крови- антитела против вирусного белка Е2 (анти-HGV Е2)    

Иммуноблоттинг—метод выявления белков, основанный на сочетании электрофореза и ИФА или РИА. Антигены возбудителя разделяют с помощью электрофореза в полиакриламидном геле, затем переносят их (блоттинг - от англ. blot, пятно) из геля на нитроцеллюлозную мембрану и проявляют с помощью ИФА. Полоски с “блотами” антигенов выпускаются различными фирмами. 1. На эти полоски наносят сыворотку больного. 2. Затем, после инкубации, отмывают от несвязавшихся антител больного и наносят сыворотку против иммуноглобулинов человека, меченную ферментом. 3. Образовавшийся на полоске комплекс [антиген + антитело больного + антитело против Ig человека] выявляют добавлением хромогенного субстрата, изменяющего окраску под действием фермента.

Иммуноферментный анализ, или метод (ИФА) — выявление антигенов с помощью соответствующих им антител, конъюгированных с ферментом-меткой (пероксидазой хрена, бета-галактозидазой или щелочной фосфатазой). После соединения антигена с меченой ферментом иммунной сывороткой в смесь добавляют субстрат/хромоген. Субстрат расщепляется ферментом и изменяется цвет продукта реакции — интенсивность окраски прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител

Иммунная электронная микроскопия – электронная микроскопия чаще вирусов, обработанных соответствующими антителами. Вирусы, обработанные иммунной сывороткой, образуют иммунные агрегаты (микропреципитаты). Вокруг вирионов образуется “венчик“ из антител, контрастированный фосфорно-вольфрамовой кислотой или другими электроннооптически плотными препаратами хорошо видимый в электронном микроскопе.

Радиоиммунный анализ (РИА), — высокочувствительный метод, основанный на реакции антиген — антитело с применением антигенов или антител, меченных радионуклидом (125J, 14С, 3Н, 51Сr и др.). После их взаимодействия отделяют образовавшийся радиоактивный иммунный комплекс и определяют его радиоактивность в соответствующем счетчике (бета- или гамма-излучение): интенсивность излучения прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) основана на амплификации, т. е . увеличении количества копий специфического (маркерного) гена возбудителя . Для этого двунитевую ДНК, выделенную из исследуемого материал а, денатурируют ( «расплетают» при нагревании) и достраивают (при охлаждении) к расплетенным нитям ДНК новые комплементарные нити . В результате из одного гена образуются два. Этот процесс копирования генов многократно по вторяется при заданных температурных режимах . Достраивание новых комплементарных нитей ДНК происходит при добавлении к искомым генам прай меров (затравки из коротких однонитевых ДНК, комплементарных 3'- концам ДНК искомого гена), ДНК - полимеразы и нуклеотидов.Для амплификации РНК вирусов применяют ПЦР с предварительным этапом обратной транскрипции (RT-PCR).