Подготовка к проведению тестов
Условия тестирования
Биотестирование проводится в лабораторных условиях в соответствии с ГОСТ 15150.
Помещение не должно содержать токсичных паров и газов.
Температура окружающего воздуха в лаборатории от +18 до 25 °C. Относительная влажность
воздуха 80 +/- 5%. Атмосферное давление 84 - 106 кПа (630 - 800 мм рт. ст.). Температура для
биотестирования (20 +/- 2) °C.
Освещение помещения естественное или искусственное, не ограничивается особыми
требованиями.
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
Для проведения биотестирования необходимо предварительно подготовить посуду,
пробоотборники, места хранения отобранных проб, а также рабочие места для обработки
доставленных в лабораторию проб наноматериалов и исследования их на токсичность. Все
процедуры предварительной подготовки должны исключать попадание токсичных, органических и
каких-либо других веществ из окружающих предметов или среды в исследуемые образцы.
5.5.1. Подготовка посуды для биотестирования
Термостаты перед проведением исследований моют горячей водой с моющими средствами и
дезинфицируют 1% раствором марганцевокислого калия.
Чашки Петри моют и ополаскивают чистой водой. При необходимости их стерилизуют в
сушильном шкафу при температуре 130 °C в течение одного часа или кипятят в воде 40 минут.
Вся грязная посуда, использованная при отборе проб, в процессе подготовки проб и проведения
биотестирования должна подвергаться стерилизации кипячением в течение одного часа. Посуду для
отбора и подготовки проб желательно подвергать автоклавированию при 121 °C и давлении 1,05
кг/кв. см в течение 15 минут.
5.5.2. Подготовка субстрата для проращивания семян высших растений
В качестве субстрата используют кварцевый песок или иной инертный субстрат. Кварцевый
песок промывают, просеивают на ситах для получения фракции 0,5 - 2,0 мм, высушивают и
прокаливают в сушильном шкафу при температуре 130 °C в течение одного часа.
Непосредственно перед проведением работы песок увлажняют до требуемой влагоемкости:
- на 60% от полной влагоемкости при 7-ми суточной экспозиции;
- до полной влагоемкости при 14-ти суточной экспозиции.
Влагоемкость песка определяется заранее по ГОСТ 12038-84. Если используются разные
субстраты, то для каждого из них заранее определяется влагоемкость и, в соответствии с ней,
проводят увлажнение субстрата.
Этикетки нарезаются из плотной бумаги и подписываются простым карандашом или шариковой
ручкой. На них указывается наименование эксперимента.
5.5.3. Приготовление исследуемых проб наноматериалов
Внесение исследуемого образца в инертный субстрат (кварцевый песок) осуществляется в
результате диспергирования предварительно подготовленной навески в таком объеме
дистиллированной воды, который бы соответствовал 60% и 100% влагоемкости субстрата из расчета
на 1 кг.
Рассчитанные навески нерастворимых в воде наноматериалов диспергируют в минимальном
количестве дистиллированной воды, обрабатывают ультразвуком 15 мин. при 10 КГц для
повышения дисперсности пробы, добавляют такой объем воды, который бы соответствовал 60% и
100% влагоемкости из расчета на 1 кг субстрата и оставляют на сутки при интенсивном
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
перемешивании на магнитной мешалке. Полученную взвесь используют в биотестировании на
токсичность.
Нанесение исследуемого образца на поверхность семян проводят путем легкого встряхивания
семян в бюксе с нужным количеством образца в течение 30 секунд. Для вещества с низкой
прилипающей способностью добавляют 1 куб. см дистиллированной воды.
5.5.4. Подготовка семян
Предназначенные для проращивания семена предварительно прогревают при температуре 30 -
40 °C в течение 5 - 7 суток в термостате.