Наноматериалами животных
Подготовка аэрозольно обработанных
Животным и сроки наблюдения
Схема введения наноматериалов
Требования к используемым культурам клеток
НАНОМАТЕРИАЛОВ НА КУЛЬТУРАХ КЛЕТОК ВЫСШИХ ЖИВОТНЫХ
IV. МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКОЕ ТЕСТИРОВАНИЕ БЕЗОПАСНОСТИ
Меры конфиденциальности
3.9.1. Сотрудники, принимающие участие в проведении медико-биологического тестирования
безопасности наноматериалов, обязаны соблюдать конфиденциальность в отношении любых данных,
полученных в ходе исследования, в соответствии с законодательством Российской Федерации.
3.9.2. Организация, проводящая исследования по медико-биологической оценке безопасности
наноматериалов, должна обеспечить конфиденциальность результатов исследований в рамках
принятых ею обязательств и в соответствии с законодательством Российской Федерации.
Используемые в экспериментах перевиваемые культуры клеток должны быть получены из
организаций, сертифицированных по соответствующему профилю. На хранение и ведение культур
клеток и тканей должны составляться инструкции или СОП, гарантирующие качество клеточных и
тканевых культур. Перед использованием культуры клеток должны быть протестированы на
жизнеспособность и функциональную активность и иметь соответствующий стандарт, указанный в
методике.
Работы по исследованию токсичности и биологической активности наноматериалов на
первичных и перевиваемых культурах тканей in vitro, а также на первичных культурах макрофагов в
системе ex vivo должны проводиться по утвержденным инструкциям и СОП. Эти документы должны
регламентировать каждый этап эксперимента, соответствовать требованиям проведения безопасных
работ с данным видом материалов.
Группы мышей обрабатывают исследуемым наноматериалом для определения острой
токсичности аэрозольно, подкожно, внутривенно, перитонеально, внутрижелудочно (в зависимости
от предполагаемого пути попадания наноматериала). Исследования проводят на 1, 10 и 30-е сутки
после введения наноматериалов на животных.
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
Для изучения хронической иммунотоксичности животных подвергают воздействию
наноматериала ежедневно на протяжении 21 дня. Исследования проводят на 1-е, 30-е и 60-е сутки
после окончания введения наноматериалов.
В экспериментах по воздействию наночастиц в аэрозольном состоянии используются морские
свинки, линейные белые мыши для последующего получения и изучения in vitro их альвеолярных
макрофагов. Животные обрабатываются аэрозольно в затравочной камере. Затравочная камера
должна иметь объем не менее 100 куб. дм и позволять одновременно обработать до 10 морских
свинок или до 60 мышей, которых предварительно помещают в специальную корзину. Аэрозоль
генерируется из водной или водно-органической дисперсии наноматериала калиброванным
стеклянным распылителем, представляющим конструктивно трубку Вентури с объемом распыляемой
жидкости до 7 куб. см. Система снабжается HEPA-фильтрами на входе воздушного потока, на выходе
воздух фильтруется через HEPA-фильтр с термообработкой выходящего воздуха при температуре 840
°C. Камера имеет возможность регулирования времени ингаляции аэрозоля, времени распада облака.
Работает по заранее выбранной программе в автоматическом режиме.
Перед экспериментом необходимо провести подбор рецептур жидкости для распыления
предлагаемого для исследования наноматериала, исходя из его физико-химических свойств и
токсичности самой жидкости. После обработки животные выдерживаются в условиях вивария
необходимое количество времени и далее поступают либо на гистологические эксперименты, либо
из них получают альвеолярные макрофаги с целью изучения их функций в условиях in vitro в культуре
тканей. Последним исследованиям придается особое значение, так как на макрофагах одного и того
же животного возможно исследовать действие различных веществ в разных концентрациях и
оценить различные функции (фагоцитоз, бактерицидную активность, цитотоксичность,
окислительный взрыв).