Измерение размеров структур

Морфометрия

Заключение среза

Жир - судан Ш - оранжевый

Специальные

Называются - оксифильными или ацидофильными

Кислые - структуры ими окрашивающиеся

Фиолетовый цвет)

Основные - структуры ими окрашивающиеся

Окрашивание среза

Приготовление срезов

Совую основу

II. лаборантские

II. лаборантские

I. врачебные

Врачебный этап:

1. забор материала -

- максимально должен отражать изучаемый объект

(столько кусочков, сколько необходимо)

- как можно более свежий

- кусочек не более 1 куб. см

- щадящее - острый инструмент, не сдавливать

2. маркировка

- простым карандашом ФИО, № истории болезни

3. фиксация

- цель – предотвратить разложение ткани

- закрепить прижизненные структуры

- формалин - 10%, нейтральный

- объем фиксатора должен быть в 20-100 раз

больше фиксируемого кусочка

- время фиксации – не менее 12 часо до

нескольких суток (для иммуногистохими

- не более 24 часов)

4. проводка материала

а. промывка - отмывают от формалина

- в проточной воде до 1 часа

б. обезвоживание

- обеспечивает проникновение парафина

- проводка по спиртам восходящей крепости до абсолютного спирта (от 60 до 100 градусов)

в. уплотнение - парафиновая заливка материала - заливка в расплавленный до 56 гр парафин

г. формирование блока

- когда парафин застыл, вырезают кусочек ткани

- насаживают на деревянную или пластмас-

- на микротомах

1. санные

2. роторные (серийные срезы)

3. замораживающие (срочные исследования)

красители:

называют базофильными (ядро – гематоксилином – в

(цитоплазма – эозином – розовый цвет)

эластические волокна - орсеином- коричневые

нервная ткань - соли серебра – черная

(импрегнация)

задачи:

- сохранение среза, достигается:

- изоляция от внешней среды

- удаление воды (спирты)

реализация:

- капля канадского (пихтового) бальзама

- покровное стекло

Виды микропрепаратов:

1. гистологические срезы тканей органов

2. мазки (кровь человека)

3. отпечатки ( с опухоли)

4. пленки (РСТ)

- метод определения числа и размеров структур

Разновидности:

1. ручная морфометрия

2. автоматизированная морфометрия

Виды морфометрических исследований:

1. подсчет индексов

2. измерение размеров структур

Индексы:

а. митотический индекс (ИМ) - число митозов на 100 (1000) клеток

б. индекс меченых ядер (ИМЯ)– при радиоавтографии – % клеток, включивших исследуемое вещество, меченое радиоизотопной меткой

г. статмокинетический индекс (СКИ) - накопление митозов в течение определенного времени после разрушения веретена деления (колхицин)

в. индекс апоптоза – частоты гибели клеток

1. окулярной микролинейкой (или окуляр-микрометра)

- позволяет получать абсолютные значения размеров

структур

- в мкм

2. морфометрических сеток

- позволяет определять относительные показатели –

долю объема, занимаемую структурой в срезе

- в %