Технология выращивания грибов - Вешенкая обыкновенная

ПЛАН

ВВЕДЕНИЕ

   Грибы были объектом внимания человека с незапамятных времен. Однако

многообразие грибов столь велико, что процесс их познания затянулся, до сих

пор еще не завершен, и так как и прежде, их исследователей ждут многочис

ленные сюрпризы. В связи с этим вполне уместно вспомнить слова француз

ского ботаника А. Вейана, сказанные им еще в 1727 г.: “Грибы – это изобрете

ние дьявола, придуманное им для того, чтобы нарушать гармонию остальной

природы, смущать и приводить в отчаяние исследователей-ботаников”.

  Грибы – бесхлорофильные организмы, которые углерод для своего роста и

развития получают из готового органического вещества. Эта огромная, насчи

тывающая почти 65000 видов группа по своему положению является промежу

точной между растениями и животными. По наличию мочевины в обмене ве

ществ, хитина в оболочке клеток, запасного продукта гликогена (а не крахмала)

они приближаются к животным. С другой стороны,  по способу питания путем

всасывания ( а не заглатывания) пищи, неограниченному росту, отсутствию

большей частью подвижности, они напоминают растения.

   Клетка гриба состоит из клеточной оболочки (снаружи она часто бывает сли

зистым слоем-капсулой), ломасом, цитоплазмы с цитоплазматической мембра

ной, эндоплазматической сетью, митохондриями, рибосомами, диктиосомами и

ядрами. Иногда в клетке грибов есть вакуоли  и различные включения.

Клеточная оболочка, осуществляющая у грибов многочисленные функции, в

том числе активного всасывания питательных веществ из субстрата, в качестве

основных компонентов содержит хитин, полисахариды, в том числе глюканы,

белки и жиры. В клеточной оболочке грибов имеются также пигменты (мела

нины, хиноны), сюда же входят различные ионы и соли. Электронно-

микроскпопическое изучение оболочек клеток грибов показывает, что они со

стоят из нескольких слоев фибриллярного строения. Эти фибриллы, представ

ляющие собой белковые микротрубочки образуют скелет, который служит ос

новой для остальных компонентов оболочки. Клеточная оболочка придает

форму клеткам гиф и органам размножения. Отличительными признаками кле

точной оболочки некоторых представителей низших грибов является отсутст

вие в ней хитина и наличия только целлюлозы.

В цитоплазме, у цитоплазматической мембраны, у грибов расположены лома

сомы – губковидные электронно-прозрачные структуры.

   Цитоплазмы грибной клетки представляет собой жидкую коллоидную среду,

в которой содержатся структурные белки, клеточные организмы и не связанные

с ними ферменты, аминокислоты, углеводы, липиды и другие вещества.

   Вакуоли – структуры округлой, реже неправильной формы, которые выпол

няют функцию депо для отложения запасных веществ или же токсических про

дуктов метаболизма. В качестве резервных веществ, здесь запасаются в основ

ном полифосфаты (метахроматин, волютин), гликаген, липиды.

    Мембранная система представлена эндоплазматической сетью в виде раз

ветвленных в цитоплазме и связанных между собой мембранных канальцев,

цистерн и полостей, выполняющих функцию внутриклеточной и межклеточной

транспортной сети для метаболитов.

   Ядро округлой или удлиненной формы, окружено двойной мембраной, имеет

ядрышко и хромосомы с ДНК. Количество ядер в грибной клетке и их размеры

различны. Известны как одноядерные клетки, так и клетки, количество ядер, в

которых достигает нескольких десятков; размеры ядер также колеблются от 2-3

мкм в диаметре до нескольких десятков микрометров. Для грибов, которым

свойственна дикариотическая фаза в развитии. Характерно наличие двух ядер,

спаренных в виде дикариона. Также грибам характерны все остальные органы

животной клетки.

   Вегетативное тело грибов состоит из гиф, имеющих вид цилиндрических тру

бок до 10 мкм в диаметре, они обладают верхушечным (апикальным) ростом и

обильным ветвлением. Внутри, гифы выполнены протоплазмой; у высших гри

бов имеются поперечные перегородки и образуются они обычно на определен

ном расстоянии от конца гифы. Значительного разнообразия достигает строе

ние клеточных перегородок, или сент, которые являются производными кле

точной оболочки  и образуются путем инвагинации (выпячивания) цитоплазма

тической мембраны внутрь клетки. Это свойственный всем грибам способ воз

никновения сент. Через них осуществляется связь с цитоплазмой соседних кле

ток, происходит перемещение питательных веществ, миграция некоторых кле

точных органов. Для большинства базидиомицетов характерен долипоровый

тип, имеющих сложное строение. Гифы высших грибов, сплетаясь между со

бой, образуют мицелий, у отдельных видов он создает подобие ткани.

   Грибы размножаются вегетативным бесполым или половым способами. Веге

тативное размножение осуществляется фрагментами мицелия, которая, отделя

ясь, дают начало новому мицелию. У дрожжевых грибов и представителей по

рядков Agaricales и Plectascales известно вегетативное размножение путем поч

кования мицелия или его клеток, в результате чего образуются отдельные клет

ки-иодии, дающие начало грибному организму. Для целого ряда грибов харак

терно вегетативное размножение путем распада на отдельные клетки-

артроспоры.

   При бесполом размножении споры гораздо более высоко специализированы

по строению и способы размножения. Среди спор бесполого размножения гри

бов по способу образования выделяют споры эндогенные и экзогенные.

   Половое размножение у грибов бывает различных типов. Сущность его за

ключается в том, что происходит слияние двух половых клеток (гамет) – муж

ской и женской – или двух вегетативных талломов, функционирующих как по

ловые клетки, в результате возникает новообразование (зигота).  Сливающиеся

гаметы содержат только половинный набор хромосом. В зиготе число хромо

сом соответственно удваивается. Гаметы являются структурами, которые нахо

дятся, имея половинный хромосом, в гаплоидной фазе, а зигота переходит уже

в диплоидную фазу.

   У высших грибов половой процесс протекает как слияние органов и клеток,

не дифференцированных на гаметы. Образовавшаяся в результате слияния зи

гота (также не дифференцированная и обычно представляющая собой лишь со

ответствующее ядерное состояние) без периода покоя переходит к дальнейше

му развитию; в ней формируются дикарионы ядер противоположных полов, ко

торые потом попарно сливаются и претерпевают редукционное деление. Гап

лоидные ядра, которые образовались в процессе редукционного деления, пере

ходят в аскоспоры,  образующиеся в сумках или в базидиоспоры, образующие

ся на специальных клетках – базидиях – базидиомицетах экзогенно.

   Грибы распространены повсеместно: их споры, обрывки мицелия, другие об

разования, встречаются на почве и в воздухе, на суше в воде. Они развиваются

на всевозможных естественных субстратах растительного и животного проис

хождения, а также на искусственных материалах созданных человеком.

    В XX в. перед человечеством встала проблема увеличения естественных и

искусственных источников белка, дефицит которого становится все ощутимее.

В связи с этим возникла необходимость введения в культуру новых белоксо

держащих организмов, среди которых одним из наиболее ценных являются

съедобные грибы. Культивирование съедобных грибов позволяет предотвра

тить пищевые отравления, вызываемые потреблением дикорастущих грибов.

Выращивать съедобные грибы можно круглый год вне зависимости от клима

тических и почвенных условий, на питательных субстратах, малопродуктивных

для иных целей, например на разных не пищевых отходах; при этом субстрат

обычно используется дважды: после сбора урожая грибов он становится цен

ным источников перегноя для садоводства и овощеводства.

   Повышение спроса на грибы на мировом рынке способствовало дальнейшему

усовершенствованию методов их выращивания на основе глубокого изучения

биологии культуры.

  В наших исследованиях мы исследовали Вешенку обыкновенную. Она входит

в сборную группу макромицеты (макро – крупные, мицеты – грибы). По строе

ния вегетативного тела макромицеты принадлежат к высшим грибам. Их мице

лий многолетний. Поселившись на определенном субстрате, он вырастает не

редко на много метров в длину. По мере роста гифы ветвятся, переплетаются. В

местах их соприкосновения возникают перемычки (анастомозы); эти перемыч

ки объединяют гифы в единый организм, осуществляют связь между ними, пе

редачу питательных веществ.

   Дереворазрущающий мицелий Вешенки развивается воздушный мицелий,

похожий на пышные кусочки ваты [19].

   Мицелий осуществляет все жизненноважные функции грибного организма –

его питание, рост и развитие, размножение. По способу питания макромицеты,

как и другие грибы, гетеротрофы, такт как лишены способности к фотосинтезу.

Поэтому они живут только там, где уже имеется готовое органическое вещест

во, и добывают его из самых разнообразных источников.

   Накопив достаточный запас питательных веществ, грибница становится спо

собной к размножению. У макромицетов этот процесс связан с образованием

грибного тела – той части грибного организма, которую мы обычно называем

грибами, забывая или вовсе не зная о том, что это лишь органы размножения,

возникающие на определенном этапе и предназначены для развития спор и их

защиты. Плодовые же тела разнообразны, располагаются, как правило, на по

верхности субстрата – следовательно, их удобно рассматривать и изучать.

Сложные плодовые тела макромицетов грибной ложной тканью, или плектен

химы, которая состоит из более или менее плотного сплетения гиф [20].

   Выше было сказано, что объектом исследования является Вешенка обыкно

венная -  Pleurotus ostreatus (Fr.) Kummer.

Надцарство: Эукариоты – Eucaryota

Царство: Грибы – Fungi

Отдел: Настоящие грибы – Eumycota

Класс: Базидиальные – Basidiomycetes

Порядок: Агариковые – Agaricales

Семейство: Трихоломовые – Tricholomtaceae

Род: Вешенка – Pleurotus

Вид: Вешенка обыкновенная -  Pleurotus ostreatus

Видовое описание Вешенки обыкновенной

   Шляпка 3-17 см., выпуклая или широковоронковидная, часто эксцентриче

ская, в начале темно-бурая, затем грязножелтовато-серая, гладкая.

   Мякоть хорошо развитая, белая, вначале мягкая, затем жестковатая, особенно

в ножке, без особого запаха и вкуса.

   Пластинки нисходящие, белые, чистые, с перемычками.

   Ножка 1- 4 х 1-3 см., цилиндрическая, сплошная, волосисто-опушенная, белая

или буроватая, иногда отсутствует.

   Споры 8 -12 х 3 – 4 мкм, вытянута – эллипсоидальные или палочковидно-

цилиндрические, гладкие, бесцветные [15].

   В последнее десятилетие в странах Европы и Северной Америки наибольшее

распространение этой культуры получило Вешенка обыкновенная. Наши ис

следования были направлены на уменьшение сроком обрастания соломы мице

лием, ускорить начало первого сбора урожая грибов. Это позволит производить

дополнительное выращивание грибов с той же площади культивационного по

мещения. Для этого использовали регулятора роста растения. Это обусловлено

тем, что грибы и растения имеют следующие сходства, позволяющие использо

вать регуляторы роста для первых:

-         способ питания - поступление питательных веществ в клетку, основан глав

     ным образом на явлениях осмоса (диффузии веществ через полупроницае

     мые перегородки поверхности клеток), не является чисто физическим, но яв

     ляется физиологическим явлением. При поступлении  питательных веществ

     в клетку гриба, клетка играет роль активную, а не пассивную, так как прони

     цаемость протоплазмы, от которой она зависит, является величиной перемен

     ной. Кроме того существует избирательная проницаемость для определен

     ных веществ и при том различная в разном состоянии клеток организма[1].

-         неограниченный рост – вегетативное тело грибов состоит из гиф имеющих

     вид цилиндрических трубок до 10 мкм в диаметре, они характеризуются

     верхушечным (апикальным) и неограниченным ростом и обильным ветвле

     нием

-         отсутствие большей частью подвижности в вегетативном состоянии

-         у высших растений тканевое строение возникает при делении клеток во всех

      направлениях. А у грибов мицелий делится только с образованием попереч

      ных направлений, т.е. только в одном направлении. Поэтому принято счи

      тать, что у грибов нет настоящих тканей, а есть лишь ложные ткани. В зави

     симости от морфологических особенностей у грибов различают два типа

     тканей: параплектенхиму и прозоплектенхиму.

  Кроме морфологического понятия существует и физиологическое понятие

 ткани у грибов. С точки зрения функционального назначения различают по

 кровные, механические и проводящие ткани. Из покровной ткани состоит

 поверхность склероциев и плодовых тел высших грибов. Клетки такой ткани

 имеют утолщенные оболочки, на поверхности откладывается пигмент, по

 глощающий лучи солнечного спектра, тем самым выполняющий защитную

 роль. Механическая ткань представлена гифами сильно утолщенными стен

 ками и суженым просветом, которые придают прочность плодовому телу

 или какой-либо его части. Типичной проводящей ткани у грибов нет, его

 функции выполняют особые специализированные гифы лишенные попереч

ных перегородок. Эти гифы, пронизывая плодовое тело в разных направле

ниях снабжают его водой. Для продвижения органических веществ имеются

гифы, являющиеся ответвлениями обычных гиф. Они отличаются густым ок

рашенным содержимым.

   Все перечисленное – т.е. функциональное сходство тканей высший расте

ний и специализированных гиф грибов говорит об еще одном сходстве.

-         вегетативное размножение – вегетативное размножение осуществляется

     фрагментами мицелия, которые, отделяясь, дают начало новому мицелию. У

     агариковых известно вегетативное размножение путем почкования мицелия

      или его клеток, в результате чего образуются отдельные клетки – оидии,

     дающие начало новому грибному организму.

-         съедобные грибы характеризуются заметных количеств минеральных ве

     ществ, содержание которых у отдельных видов может достигать 11,5% (в

     среднем 7,7%). Плодовые тела грибов богаты калием, фосфором, в незначи

     тельных количествах содержится в них натрий и кальций, содержание желе

     за у макромицетов приблизительно аналогично тем количества его, которое

    обнаруживают в большинстве растительных продуктов.

        Т.е. сходство в химическом составе плодовых тел высших грибов и про

дуктов высших растений[8].

-         нахождение и образование регуляторов роста (ауксинов и других) характер

     ных для высших растений, обнаружены у некоторых видов грибов.

   Вещества, вырабатываемые растениями и способствующие их росту, получа

ли различные названия: ростовые вещества, гормоны роста, фитогормоны, сти

муляторы роста и т.д. В 1961 году решением специального научного комитета

по физиологии растений в США для этих веществ было принято единое назва

ние “регуляторы роста”. При этом имелось в виду, что эти вещества стимули

руют рост в одних, в других – тормозят его. И во всех случаях они рассматри

ваются как физиологически активные вещества,  включающиеся в обмен ве

ществ в растении и оказывающие влияние на ход этого обмена. Изучение регу

ляторов роста во многом зависело от возможности получении этих веществ в

достаточных количествах. Необходимо было установить природу этих веществ.

   Чрезвычайно малое количество регуляторов роста в проростках овса застави

ло искать другие источники получения этих веществ. Более перспективными с

этой точки оказались некоторые грибы. И наконец, было обнаружено, что регу

ляторы роста в достаточном количестве имеются в человеческой моче.

   В 1931 году голландским химикам Кёглю и Хаген-Смиту удалось выделить из

человеческой мочи вещество, названное ими ауксином. Они полагали, что это

вещество стимулирует рост посредством растяжения клеток. Близкое к этому

вещество, выделенное из кукурузного масла, было названо ауксинов Б, в отли

чии от вещества выделенного из мочи и названного ауксином А.

   Затем эти же ученые выделили из мочи вещество, названное ими гетероаук

сином, что означает “другой ауксин”. Химический анализ показал, что гетероа

уксин тождествен индолиликсисной кислоте, синтез которой известен с 1885

года.

   Для дальнейших исследований регуляторов роста открытия Кёгля и Хаген-

Смита имели неоценимое значение. Имея в своем распоряжении в чистом виде

и в достаточных количествах регуляторы роста, физиологи растений смогли

развернуть обширные экспериментальные работы для разрешения проблемы

воздействия этих веществ на рост и развитие организмов.[5]

   После того, как физиологам растений стали доступны достаточные количест

ва химически чистого кристаллического препарата гетероауксина, работы по

изучению действия этого регулятора роста на растительный организм получили

огромный размах. За короткий срок ученые разных стран опубликовали более

100 тысяч научных сообщений. [6]

1. Цель и задачи, методика выполнения работы.

  Экспериментальная часть работы выполнялась в условиях лаборатории совхо

за декоративных растений, расположенного в городе Воронеж.

   Работы, рассмотренные в кратком обзоре литературы, свидетельствуют о це

лесообразности использования регуляторов роста при выращивании гриба Ве

шенки. В качестве субстрата была солома озимой пшеницы. В связи с этим на

ми в лабораторных условиях изучались разные формы регуляторов роста.

   В задачу наших исследований входило:

1.    

     на скорость прорастания зернового мицелия.

2.    

      нии гриба Вешенки

3.    

   Решение поставленных вопросов предусматривалось, путем постановки лабо

раторных опытов. При закладке и проведении опытов использовались методи

ческие указания (Дудкин И.А.) и специальные методические разработки. Это

выращивание чистой культуры на гибридной среде сусловный агар – в Матрах,

предложенные и внедренные нами при проведении данной исследовательской

работы.

1.1 Цель и задачи работы

   При выполнении экспериментальной части работы нами была предусмотрена

следующая цель – изучить влияние регуляторов роста растений на скорость

прорастания зернового мицелия Вешенки обыкновенной в субстрате соломы

озимой пшеницы.

   Необходимость изучения обуславливается следующими фактами: уменьше

ние сроков обрастания соломы мицелием, ускорение начала первого сбора

урожая грибов. Это позволит производить дополнительное выращивание гри

бов с той же площади культивационного помещения, что в нынешних сложных

финансовых условиях, даст возможность получить с единицы площади боль

ший объем продукции грибов Вешенки.

    А в задачи наших исследований входило:

-         выяснение оптимальных форм регуляторов роста при выращивании гриба

Вешенки. Так к сегодняшнему дню человечеству известно большое количе

ство форм регуляторов роста. Для наших исследований мы взяли 2 формы,

которые являются исторически первыми изученными физиологами расте

ний и полученные – гетероауксин и гибберелин. И три формы более моло

дые в изучении – гумат натрия, гибберсиб – 2, парааминобензойная кислота.

Так же одной из задач наших исследований является нахождение сравни

тельно эффективного влияния выбранных нами форм регуляторов роста при

выращивании гриба Вешенки обыкновенная, и найти наиболее эффектив

ные формы регуляторов роста на скорость проростания зернового мицелия

и на урожайность грибов Вешенки

-       проанализировать влияние регуляторов роста на урожайность гриба Вешен

    ки, и при этом нужно учитывать важность этих эксперимнтов для производ

   ства и экономической эффективности выращивания гриба Вешенки обыкно

     венной.

1.2 Методика выполнения работы    

   Культивирование высших Базидиальных грибов предполагает:

1)    наличие чистой высокопродуктивной культуры;

2)    определение условий необходимых для роста грибов;

3)    подготовку стандартного посевного материала;

4)    выбор необходимых условий проведения, подготовку и стерилизацию пита

     тельных сред.

Получение чистых культур высших базидиальных грибов.

   Чистые культуру базидиомицетов могут быть выделены из плодовых тел ба

зидиоспор, путем их проращивания из корней микоризиообразующих растений

или же почвы, древесины и других субстратов, являющихся средой обитания

этих грибов. Наиболее простым и удобным способом получения желаемых

культур высших базидиальных грибов является выделение культур из плодо

вых тел или базидиоспор, если они легко прорастают. Выделение культур из

субстрата или миноризных окончаний корней, применяющиеся для специаль

ных исследований, мало эффективно, и идентификация полученных культур

представляет большие трудности (Шемаханова, 1962).

Получение чистых культур из плодовых тел

   Для выделения следует выбирать молодые, не поврежденные плодовые тела,

так как они меньше инфецированы микроорганизмами. Выделение можно про

водить в день сбора или хранить плодовые тела в течение двух-трех дней в хо

лодильнике в полиэтиленовых мешочках.

   Обработка плодовых тел.

   Перед выделением плодовое тело следует осторожно очистить от прилипших

растительных остатков, промыть в проточной и стерильной воде и положить на

фильтровальную бумагу, чтобы оно обсохло. Промывать плодовые тела нужно

быстро, чтобы они не напитались водой. Плодовое тело можно простерилизо

вать, обтирая 96-градусным спиртом или погружая на несколько секунд в 1%-

ный раствор сулемы, 3%-ный раствор перекиси водорода, раствор формалина

(1:300), после чего тщательно отмыть в воде и дать обсохнуть. Плодовое тело

можно так же быстро обжечь над пламенем горелки.

Выделение инокулюма.

   Предварительно обработанная одним из описанных выше способов плодовое

тело разламывают и переносят на спар кусочек “ткани” из середины стериль

ным скальпелем, ланцетом или копьем. Ни в коем случае не обжигать иноку

люм в пламене горелки. Выделят инокулюм из разных частей плодового тела:

шляпки, ножки,  место перехода шляпки в ножку, гимениального слоя. При вы

боре участка ткани нужно исходить из размеров и строения плодового тела. 

Выделение лучше производить из самой толстой части плодового тела.

   Кусочки плодового тела помещают на питательную среду в чашки Петри, ча

шечки для тканевых культур или пробирки. Расход среды при посеве на чашки

для тканевых культур (диаметр 5-7 см.) незначителен, в каждой такой чашке

находится только один кусочек, что важно для предотвращения загрязнения.

Кусочки плодового тела помещают сверху на спар или частично погружают в

агаризованную среду. Инокулюм  дереворазрушающих рекомендуется выде

лять следующим образом (Punaren, 1967). Во влажную камеру помещают тща

тельно отмытые, разрезанные плодовые тела или же кусочки древесины, прони

занные мицелием гриба. Чашку с инокулюмом помещают в термостат при тем

пературе 20-25 градусов С; при температуре 26-28 градусов С и выше скорость

выделения может замедляться. Желательно чтобы относительная влажность

воздуха была не ниже 80%, для чего в термостат можно поставить сосуд с во

дой.

   Выделение культур обычно производят на плотную среду: суслоагар, солодо

вый агар, картофельно-глюкозный агар и т.д. Если выделение идет плохо или

мицелий не переходит с инокулюма на поверхность среды, в состав последней

следует добавить дрожжевой автолизат, отвары коры, хвои или листьев различ

ных высших растений (обычно в количестве от 0.5 до 5%), экстраты из плодо

вых тел грибов. В чашках Петри вместе с колониями  базидиальных грибов мо

гут расти колонии плесневых грибов, дрожжей, бактерий, что обычно легко за

метить. В таких случаях предполагаемые колонии базидиомицетов нужно по

следовательно пересеять и избавиться от инфекций с помощью обычных мето

дов микробиологической техники.

   Но следует иметь в виду, что разные штаммы одного и того же вида могут

значительно отличаться по скорости роста и требованию к питательной среде.

По разному происходит выделение из плодовых тел неодинакового возраста.[9]

Остальные методы, т.е. из базидиоспор, субстратов, миноризных окончаний

корней в наших исследованиях малоэффективны.

Условия необходимые для роста грибов.

   Рост грибов происходит при определнных условиях: наличие источников пи

тания – углерода, азота, водорода, неорганических соединений, содержащих

калий, натрий, фосфор, магний, кальций, серу и железо; микроэлементов – мар

ганца, цинка, молибдена, кобальта, меди, бора и др. стимуляторов роста, опти

мальной температуры, степени аэрации, света и других факторов.

   Все источники питания разделяются на природные (естественные) питатель

ные субстраты и искусственные питательные среды, строго определенного со

става, содержащие необходимые элементы в усвояемой форме.

   Из естественных питательных субстратов используют зерно в натуральном

виде, настоек или отваров (пивное сусло, кукурузный экстрат), добавляемых к

искусственным питательным средам.

   Питательные вещества могут усваиваться только при определенной кислот

ности питательной среды, т.к. проницаемость оболочек грибов клеток изменя

ется в зависимости от pH среды. Большинство грибов развиваются при pH сре

ды 4.5-6.0. Реакция среды в процессе роста культуры грибов может значительно

изменяться. Различают оптимальные условия pH среды для прорастания спор,

для вегетативного развития мицелия, для спорообразования. Смещение pH воз

можно для одного и того же гриба как в сторону подкисления, так и в сторону

подщелачивания в зависимости от источников питания (Наумов, 1937).

   Не меньшее значение для роста грибов имеет температура их выращивания.

Температурный оптимум – 22-25 градусов С.

   Для хорошего развития мицелия гриба влажность воздуха в помещении

должна поддерживаться в пределах 95-97%.

   Грибы растут при определенных условиях освещения. Освещение при обрас

тании соломы мицелием не важно.

Получение в культуре плодовых тел.

   Получение в культуре нормально развитых плодовых тел является наиболее

надежным способом правильного определения культуры, а для получения пло

довых тел хорошо плодоносящей Pleurotus ostreatus обычно используют тот же

субстрат, на котором сохраняется в лаборатории культура гриба – сусловый

агар, малый агар и т.д.  Для вешенки может применяться среда Бэднона (Бэд

кок, 1941,1943), состоящая из древесной муки с добавкой костной муки, карто

фельного крахмала, сахара и древесной золы. Богатый питательными вещест

вами субстрат, способствующий хорошему вегетативному росту мицелия, не

всегда является оптимальным для образования плодовых тел. В некоторых слу

чаях появление плодоношения стимулирует перенос гриба на бедную среду. У

Вешенки плодоношение стимулируется добавлением в питательную среду цел

люлозы в виде фильтровальной бумаги или соломы.

   Время появление плодовых тел различно в зависимости от вида и штамма

гриба, условий выращивания и состояния культуры.

   Свет является одним из наиболее важнейших условий для развития плодовых

тел.  На первых стадия развития зачатков плодовых тел достаточно незначи

тельного освещения, а для образования плодовых тел вешенки необходимо ос

вещение 2000-8000 лк  в течение 14 часов. Температура, оптимальная для пло

доношения часто не совпадает с оптимальной температурой для роста мицелия.

Так максимум плодоношения у вешенки при температуре от 15 до 17 градусов

С, а оптимум – 22 – 25 градусов С.

   Аэрация и влажность влияют на образование и формирование плодовых тел.

Снабжение культур свежим воздухом с 95-97 % относительной влажности бла

гоприятно сказывается на развитии плодовых тел. При высоком содержании в

среде CO₂ наблюдается появление абортивных плодовых тел и задержка в раз

витии шляпки, изменяются ее размеры и появляются морфологические измене

ния. Если воздух не обновляется, то могут образовываться лишь зачатки плодо

вых тел. [14]

   Выделяют два способа выращивания Вешенки обыкновенной:

   экстенсивный и интенсивный.

   Выращивание Вешенки обыкновенной экстенсивным способом.

   Вешенка обыкновенная может произрастать на стволах многих лиственных

деревьев, однако наилучшими субстратными растениями для нее является то

поль, ива, граб, бук и дуб. Древесина должна быть здоровой, не пораженной

другими грибами. Лучше всего использовать свежесрубленную древесину, со

держащую достаточное количество воды, необходимой для развития гриба. Не

следует брать стволы диаметром меньше 15 см., поскольку урожайность грибов

на них будет низкой. Инокуляцию мицелием производят весной, когда в подва

лах (без специального подогрева) поддерживается температура оптимальная

для его развития. Перед инокуляцией мицелием стволы распиливают на бруски

одинаковой длины (30-35 см.), следя за тем, чтобы не испачкать их почвой. По

сле распиливание производят вакцинацию брусков. Затем их устанавливают в

подвалах, вертикально друг от друга, инокулируя один конец мицелием. На

этот конец, инокулированный конец следующего бруска, а его противополож

ный конец инокулируют. Высоту столба доводят до 2-2.5 м. Слой мицелия на

брусках должен быть не менее 1 см. толщиной. На верхний брусок сверху по

мещают доску толщиной 5-6 см. На нее наносят слой соломы и слой почвы вы

сотой15 – 20 см. Это способствует поддержанию влажности и постоянной тем

пературы субстрата, хорошему росту мицелия. Через такую “покрышку” бру

ски получают достаточное количество воздуха. Относительная влажность воз

духа должна быть выше 90%. Через 2-3 месяца мицелий хорошо развивается по

всему бруску. [12]

   Затем бруски пронизанные мицелием следует перенести для плодоношения

на лесные поляны, приусадебные участки, где достаточно много влаги (но не

грунтовой) и нет прямых солнечных лучей. Бруски вкапывают таким образом,

чтобы их нижняя часть на несколько сантиметров была погружена в почву.

Плодовые тела появляются через 1 – 3 недели после перенесения брусков. [11]

   Плодоношение длится 3 – 5 лет. Наибольший урожай вешенка обыкновенная

дает на первом году плодоношения. В последующие годы бруски особого ухода

не требуют.

   Таким образом экстенсивный способ культивирования вешенки обыкновен

ной прост, дешев, однако качество и количество урожая в большей мере зави

сит от факторов внешней среды, поэтому  регулировать этот процесс невоз

можно. Указанные недостатки устраняются при интенсивных способах выра

щивания. [16]

Выращивание вешенки обыкновенной интенсивным способом.

   При интенсивном выращивании грибов вешенки одним из лучших субстратов

является солома озимой пшеницы. Перед проведением пастеризации солому

необходимо измельчить от 30 – 80 мм до 14 мм. Для этих целей можно исполь

зовать различные измельчители соломы. Если партия соломы небольшие, мож

но ее измельчать секатором или садовыми ножницами.

  В качестве добавок к субстрату можно применять измельченные стержни по

чатков кукурузы, а также подсолнечную шелуху до   15 – 20% от общего веса

субстрата. В качестве органических добавок можно использовать отруби – от 2

до 5 % общего веса субстрата.

   Измельченную солому засыпают в емкость, где будет производиться стерили

зация. Емкость заполняется субстратом до ¼ части объема, заливается водой,

желательно, до 25 градусов С на 15-20 минут, перемешивается и затем грязная

вода сливается. Субстрат снова заливают водой,  можно горячей. Стерилизация

протекает в запарке при температуре 100-110 градусов С в течение 2 часов.

Поддерживают такую температуру либо пропусканием пара через запарник,

либо подогревая воду электрическими тенами.

   После стерилизации субстрата воду из запарника сливают и охлаждают суб

страт до 25 градусов С, затем в субстрат добавляют органические добавки,

предварительно также постерилизованные. После перемешивания субстрата с

добавками в запарник можно вносить мицелий. Примерно на 100 кг субстрата

нужно минимум 2 кг мицелия. Все опять тщательно перемешивается и вносится

в полиэтиленовые мешки. Можно вносить мицелий непосредственно в процес

се заполнения мешков субстрата – послойно. Субстрат с добавками и мицелием

переносят в полиэтиленовые мешки размером 40 - 45 см х 80 – 90 см. Жела

тельно, чтобы в мешок помещалось до 10 – 15 кг стерилизованного субстрата.

Предварительно  в мешках пробойником делают отверстия диаметром 15 – 20

мм. На расстоянии 10 х 10 см по углам квадрата пробивают по одному отвер

стию [10].

   Мешки предварительно стерилизуют в двух процентном растворе хлорной

извести или в 0,01% растворе марганцовки. Мешки заполняются на 2/3 объема

субстратом. При заполнении мешков субстрат не утрамбовывают, а укладыва

ют плотной равномерной массой, без воздушных промежутков. Затем мешки не

туго завязывают и переносят в проростное помещение. Проростное помещение

перед внесением туда субстрата дезинфицируют.

1.     Стены и пол промывают 1% раствором хлористой щелочи, затем проводят

     окуривание формальдегидом. На 100 м³ помещения необходимо 2 литра

     40% формалина и 400 гр. хлорной извести. Равномерно по площади поме

    щения устанавливают емкости, желательно стеклянные, фарфоровые или

    эмалированные. Равномерно в них насыпают хлорную известь и заливают

   формалином. Помещение на 2 – 3 суток закрывают, а затем в течение 3 – 4

   суток проветривают.

2.     Помещение опрыскивают 4% раствором хлорной извести. Приготавливают

раствор, выдерживают его в течение 2-х часов, взбалтывают и опрыскива

телем обрабатывают помещение. Закрывают помещение на двое суток, а

затем интенсивно вентилируют в течение 5 – 7 дней.

3.     Проводят опрыскивание помещения раствором формалина – раствор гото

вится из расчета 250 мл 40% формалина на 10 л воды. Расход раствора на

100 м³ помещения примерно 20 л. Помещения обрабатывают опрыскивате

лем, закрывают на двое суток, а затем в течение 4-х дней интенсивно про

ветривают.

4.     Обработку горящей серой проводят из расчета 500 гр серы на 100 кубиче

ских метров помещения. Серы медленно сжигают в емкостях, установлен

ный на электрических печках в помещении. Через два дня помещения про

ветривают в течение 3 – 4 дней.

5.     В случае появления грибных мух, в культивационных помещениях прово

дят окуривание в течение 2 – 4 часов препараторами монофоса, карбофоса

или пагоса из расчета 800 гр на 100 кубических метров помещения.

   Мешки в проростном помещении устанавливают друг на друга, не более чем

в 2 – 3 ряда.

   Температура в проростном помещении должна составлять 22 – 25 градусов С,

а в мешках с субстратом – не более 28 градусов С.

   Влажность воздуха поддерживается в пределах 95 – 97. Освещение при об

растании соломы мицелием не нужно.

   В случае появления в мешках инфицированных участков, они должны быть

удалены и обработаны раствором поваренной соли из расчета 250 гр на 1 л.

Соль лучше растворять в горячей воде.

   После зарастания субстрата мицелием мешки переносят в растительное по

мещение и развешивают согласно принятой для каждого культивационного по

мещения схеме.

   Температура в растительном помещении поддерживают в пределах от 15 до

17 градусов С. Влажность – 95 – 97%. Нежелательно попадание крупных капель

на мешки с субстратом и сбор воды на полу.

   При росте плодовых тел в растительном помещении необходимо освещение в

течение 12 часов в сутки. Интенсивность освещения необходимого для нор

мальной пигментации достаточно в пределах от 100 до 180 люксов.

   Допустимая концентрация в помещении углекислого газа – не более 1%. Для

этого, в помещении необходимо включат вентиляцию 4 – 6 раз в течение свето

вой части суток. [22]

   Грибы желательно срезать ножом так, чтобы на мешках не оставалось частей

плодовых тел. В случаях реализации грибов в свежем виде их лучше сразу ук

ладывать в полиэтиленовые пакеты весом до 500 гр. Затем укладывать пакеты в

контейнеры и отправлять сразу в холодильник или на реализацию.

   После сбора грибов, примерно через 2 недели начинается 2 волна урожая. В

первую волну обычно собирают до 60 – 70% урожая, вторая волна дает 15 –

20% и третья около 10%. Обычно выращивают и убирают урожай первой и вто

рой волны.

   При соблюдении технологического процесса с 10 кг субстрата минимальный

сбор грибов за 1 ротацию составляет около 3 кг. В одном культивационном по

мещении за год проводится как минимум 3 ротации.

   Отработанный субстрат можно использовать в качестве добавок для скота. Он

содержит много белковых веществ, в том числе почти все незаменимые амино

кислоты. На его основе можно готовить жидкий корм для свиней, кур и других

животных. [16]

   Урожай грибов по каждому из изучаемых вариантов опыта проводился, путем

взвешивания каждого варианта с 10 кг субстрата.

   Данные урожая грибов и скорости обрастания субстрата – соломы озимой

пшеницы подвергались математической обработке методом дисперсионного

анализа (В. Н. Доспехов, 1987) с помощью ЭВМ. Экспериментальный материал

изложен в двух главах.

1.3 Схема опытов

  Исследования проводились по единой программе в лабораторных условиях

совхоза декоративных растений расположенного в г. Воронеже 1997-1998 гг.

СХЕМА ОПЫТА

1.    

2.     Гетероауксин в дозе 0,005%

3.     Гиббериллин в дозе 0,005%

4.     Гибберсиб в дозе 0,005%

5.     Гумат натрия в дозе 0,005%

6.     Парааминобензойная кислота в дозе 0,005%

   Обработка субстрата соломы озимой пшеницы регуляторами роста происхо

дит во время внесения в него зернового мицелия.

2. Регуляторы роста, их значение при выращивании грибов

вешенки обыкновенной

   После того, как физиологам стали доступны достаточные количества химиче

ски чистого кристаллического препарата гетероауксина, работа по изменению

действий этого регулятора роста на растительный организм получили огром

ных размах. И уже после открытия и синтеза гетероауксина было испытано

действие на растительный организм других органических кислот типа гетероа

уксина. В настоящее время синтезировано большое количество органических

соединений, обладающих физиологической активностью, подобно гетероаук

сину, но не обнаруженных в растительном организме. Все эти вещества назы

вают синтетическими регуляторами роста.

   Естественные и синтетические регуляторы роста получили широкое распро

странение при исследованиях возможности воздействия на растительный и

грибной организм с целью управления их ростом и развитием. Было проведено

большое количество исследований по выяснению свойств регуляторов  роста и

их физиологической роли, распространение регуляторов роста в растительном

мире, способов их передвижения по тканям.

   Оказалось, что регуляторы роста не являются специфичными, т.е. будучи об

разованны в одном организме, они эффективны по отношению к другим, под

час систематически далеким. Скорость распространения регуляторов роста по

тканям значительно превышает скорость обычно диффузии. Движение регуля

торов роста в организме происходит главным образом полярно, т.е. в одном на

правлении.

   Воздействие одного и того же физиологически активного вещества может вы

звать различную реакцию организма. На основании этого многие ученые вы

сказали предположение о поливалентности действия регуляторов роста.

   Физиологически активные вещества находятся в растительных продуктах – в

муке, солоде, растительных маслах. Ауксины найдены в тканях высших живот

ных, в слюне и моче. Есть предположение, что они попадают в животный орга

низм с растительной пищей, богатой ауксинами. Интересно в этом отношении

опыты, показавшие, что при гидролитическом распаде арахисового масла под

влиянием фермента липазы образуются ауксины. Для образования ауксинов

плесневые грибы и бактерии нуждаются в питательной среде, содержащей глю

козу, а также триптофан, тирозин и другие аминокислоты. [6]

   Сказанное выше дает нам право говорить о целесообразности применения ре

гуляторов роста при интенсивном выращивании вешенки обыкновенной. Это

предположение подтверждается ниже.

   Регуляторы роста представляют следующие группы органических соедине

ний:

1.    

2.    

     ся к алициклическим соединениям флуоренового ряда;

3.    

4.    

2.1 Влияние гетероауксина на скорость “прорастания” зернового мицелия

   В 1931 году голландским химикам Кеглю и Хаген-Смиту удалось выделить из

человеческой мочи вещество, названное ими ауксином. Они полагали, что это

вещество стимулирует рост по средством растяжения клетки. Близкое к этому

веществу, выделенное из кукурузного масла, было названо ауксином – б в от

личие от вещества, выделенного из мочи и названного ауксином – а.

   Затем эти же ученые выделили из мочи человека вещество названное ими ге

тероауксином, что означает “другой ауксин”. Химический анализ показал, что

гетероауксин тождествен индолилуксусной кислоте, синтез которой известен с

1885 года. [6]

   Ауксины представляют собой кислоты, в состав которых входит ненасыщен

ное циклическое ядро, или их производные.