Переливание крови
Источники крови
Кровь, ее препараты и компоненты широко используются в медицинской практике для лечения различных заболеваний. Заготовку крови, ее консервацию, разделение на компоненты и изготовление препаратов осуществляют станции переливания крови или специальные отделения в больницах. Для получения препаратов крови используют специальные сепарирующие, морозильные, лиофилизирующие установки. Основным источником крови являются доноры. В нашей стране донорство добровольное: любой здоровый гражданин может стать донором. Состояние здоровья доноров определяют при обследовании. Обязательно проводят исследование реакции Вассермана на сифилис, исследование на носительство вирусов гепатита н СПИДа. В качестве источника крови доноры могут использоваться для прямого, т. е. непосредственно больному, переливания крови.
Для переливания может быть использована утильная кровь, при этом первостепенное значение имеет плацентарная кровь. Ранее использовали кровь, полученную при кровопускании, применявшемся для лечения больных эклампсией, больных с гипертоническим кризом.
Плацентарную кровь собирают сразу же после рождения ребенка и перевязки пуповины. С соблюдением асептики вытекающую из сосудов пуповины кровь собирают в специальные сосуды с консервантом. Из одной плаценты получают до 200 мл крови. Кровь каждой родильницы собирают в отдельные флаконы.
Идея использования и методика заготовки, хранения и переливания трупной крови принадлежит нашему соотечественнику В. Н. Шамову. Много сделал для широкого практического применения трупной крови С. С. Юдин. Используют кровь от трупов практически здоровых людей, умерших внезапно, без длительной агонии, от случайных причин (закрытые травматические повреждения, острая сердечная недостаточность, инфаркт миокарда, кровоизлияния в мозг, поражение электрическим током). Не используют кровь умерших от инфекционных, онкологических заболеваний, отравлений (кроме алкогольных), заболеваний крови, туберкулеза, сифилиса, СПИДа и др. Кровь внезапно умерших отличается тем, что в течение 1—4 ч после смерти она не свертывается вследствие выпадения фибрина (дефибринированная кровь). Забор крови осуществляют в сроки не позже 6 ч после смерти. Кровь, вытекающую из вен самотеком, с соблюдением правил асептики собирают в специальные емкости н используют для переливания или приготовления компонентов или препаратов крови. От трупа можно получить от 1 до 4 л крови. Полученную из разных источников кровь на станциях заготовки крови расфасовывают, проверяют групповую (система АВО) и резус-принадлежность, определяют возможность наличия в крови вирусов гепатита, СПИДа. Ампулы или пакеты с кровью маркируют с указанием объема, даты заготовки, групповой и резус-принадлежности крови.
Важным источником крови является больной, у которого в предоперационном периоде производится изъятие крови с последующим консервированием ее и переливанием ему же во время операции (аутогемотрансфузия).
Возможно использование крови, излившейся в серозные полости (плевральную, брюшную) при заболеваниях или травматических повреждениях — аутокровь. Такая кровь не нуждается в проведении проб на совместимость, меньше вызывает реакций при переливании.
МЕХАНИЗМ ДЕЙСТВИЯ ПЕРЕЛИТОЙ КРОВИ
Переливание крови является, в сущности, трансплантацией живой ткани, обладающей сложной, многообразной функцией. Гемотрансфузия позволяет восполнить объем циркулирующей крови, что определяет восстановление кровообращения, активизацию обмена, улучшение транспортной роли крови в переносе кислорода, питательных веществ, продуктов метаболизма. С переливаемой кровью вводятся ферменты, гормоны', участвующие во многих функциях организма. Переливаемая кровь длительное время сохраняет функциональную способность, обеспечиваемую форменными элементами, ферментами, гормонами и др. Так, эритроциты в течение 30 дней способны нести функциональную нагрузку — связывать и переносить кислород. Длительное время сохраняется так же фагоцитарная активность лейкоцитов.
Важное свойство переливаемой крови — повышать гемостатическую (кровоостанавливающую) функцию крови. Это особенно важно при тех или иных нарушениях в свертывающей системе крови, наблюдаемых при таких патологических процессах, как гемофилия, холемия, геморрагические диатезы и т. д., а также при кровотечениях. Гемостатический эффект переливаемой крови обусловлен введением факторов свертывания крови. Наиболее выраженное гемостатическое действие оказывает свежая кровь или кровь с небольшим (до нескольких дней) сроком хранения.
Дезинтоксикационное действие перелитой крови определяется разведением циркулирующих в крови реципиента токсинов, абсорбцией некоторых токсинов форменными элементами крови. При этом играет роль увеличение транспорта кислорода как окислителя ряда токсических продуктов, а также увеличение переноса токсических продуктов в органы (печень, почки), обеспечивающие связывание или выведение токсинов.
Переливаемая кровь оказывает иммунокорригирующее действие: в организм вводятся нейтрофилы, обеспечивающие фагоцитоз, лимфоциты (Т-, В-клетки), определяющие к.1е-точный иммунитет Стимулируется и гуморальный иммунитет зу счет введения иммуноглобулинов, интерферона и других факт ров.
Таким образом, механизм действия переливаемой крови сложен и многообразен, что определяет лечебную эффективность гемотрансфузий в клинической практике при лечении самых разнообразных заболеваний не только в хирургии, но И в клинике внутренних, инфекционных и других заболеваний.
ОСНОВНЫЕ ГЕМОТРАНСФУЗИОННЫЕ СРЕДЫ
Консервированная кровь. Готовят с применением одного из консервирующих растворов; роль стабилизатора играет цитрат натрия, который связывает ионы кальция и предупреждает свертывание крови, роль консерванта — глюкоза, сахароза и др. Наиболее распространенными консервирующими растворами являются растворы ЦОЛИПК № 76, ЦОЛИПК № 12. в которые, кроме консерванта, входят левомицетин, глюкоза. Консерванты добавляют в соотношении с кровью 1: 4. Кровь выпускают во флаконах вместимостью 250 или 500 мл или в пластиковых мешках. Хранят ее при температуре 4 -6°С. Срок хранения такой крови 21 день
При острой кровопотере, острой гипоксии целесообразно использовать кровь небольших (3—5 дней) сроков хранения
Свежейнтратная кровь. В качестве стабилизирующего раствора используют 6% раствор цитрата натрия в соотношении с кровью I : 10. Такая кровь используется непосредственно или п ближайшие часы после заготовки.
Гепаринизнрованная кровь. Ее применяют для заполнения аппаратов искусственного кровообращения. В качестве стабилизатора и консерванта используют гепарин с глюкозой и левомицетином. Гепаринизированную кровь хранят при температуре 4°С. Срок хранения 1 сут.
Компоненты н препараты крови. Эритроцитарную массу получают из цельной крови, из которой удалено 60—65% плач мы путем отстаивания или центрифугирования. Она отличается от донорской крови меньшим объемом плазмы и высокой концентрацией эритроцитов (гематокритное число 0,65—0,80 л/л) Вы пускают во флаконах или пластиковых мешках. Хранят при температуре 4—6°С. Срок хранения 21 День при использовании консервантов ЦОЛИПК № 76 или ЦОЛИПК № 12.
Эритроцитная взвесь представляет собой смесь эритроцитной массы « консервирующего раствора ЦОЛИПК Кг 8. Стабилизатором является цитрат натрия в соотношении 1:1. Хранят при температуре 4—6°С. Срок хранения 8—15 дней.
Показаниями к переливанию эритроцитарной массы и эритроцитной взвеси служат кровотечение, острая кровопотеря, шок, заболевания системы крови, анемии н септические состояния.
Отмытые и размороженные эритроциты получают путем удаления из крови лейкоцитов, тромбоцитов и белков плазмы, для чего кровь подвергают 3 5-кратному отмыванию специальными растворами н центрифугированию. Замораживание эритроцитов может быть медленным в электрохолодильниках при температуре от —70 до —80°С или быстрым с использованием жидкого азота {температура — 196°С). Замороженные эритроциты хранят в течение 8—10 лет. Для размораживания эритроцитов контейнер опускают в водяную баню температуры 45°С и затем отмывают от ограждающего раствора. После размораживания эритроциты хранят при температуре 4°С не более 1 сут..
Преимуществом размороженных эритроцитов является низкое содержание сенсибилизирующих факторов (белки плазмы, лейкоциты, тромбоциты), факторов свертывании, свободного гемоглобина, калия, серотонина. Это определяет показания к их трансфузии: аллергические заболевания, посттрансфузионные реакции, сенсибилизация больного, сердечная, почечная недостаточность, тромбозы и эмболии. Можно использовать кровь универсального донора и избежать синдрома массивной гемотрансфузни. Отмытые хитинные или размороженные эритроциты переливают больным при наличии несовместимости по лейкоцитарным антигенам системы НЬА или сенсибилизированным к плазменным белкам.
Тромбоцитную массу получают из плазмы консервированной донорской крови, хранившейся не более суток, путем легкого центрифугирования. Хранят ее при температуре 4°С в течение 6—8 ч. а при температуре 22°С — 72 ч. Целесообразно использовать свежезаготовленную массу. Продолжительность жизни перелитых тромбоцитов — 7—9 дней.
Показаниями к трансфузии тромбоцитной массы служат тромбоцитопении различного происхождения (заболевания системы крови, лучевая терапия, химиотерапия), а также тромбоцитопении с. геморрагическими проявлениями при массивных гемотрансфузиях, проводимых по поводу острой кровопотери. При трансфузии тромбоцитной массы следует учитывать групповую (система АВО) совместимость, совместимость по резус-фактору, проводить биологическую пробу, так как при получении тромбоцитной массы возможна примесь эритроцитов донорской крови. Лейкоцитная масса представляет собой среду с высоким содержанием лейкоцитов и примесью эритроцитов, тромбоцитов и
плазмы. Получают препарат путем отстаивания и центрифугирования. Хранят во флаконах или пластиковых мешках при температуре 4 — 6°С не более 24 ч, более целесообразно переливать свежезаготовленную лейкоцитную массу. При переливании следует учитывать групповую и резус-принадлежность донора и реципиента, а в необходимых случаях — совместимость по антигенам НЬА. Трансфузии лейкоцитной массы показаны при заболеваниях, сопровождающихся лейкопенией, при агранулоцитозе, при угнетении кроветворения, обусловленном лучевой и химиотерапией, при сепсисе. Реакции и осложнения могут быть в виде одышки, озноба, повышения температуры тела, тахикардии, падения артериального давления.
Плазму крови жидкую (нативную) получают из цельной крови путем либо отстаивания, либо центрифугирования. Плазма содержит белки, большое количество биологически активных компонентов (ферменты, витамины, гормоны, антитела). Плазму используют сразу после получения, не позднее чем через 2 — 3 ч, При необходимости более длительного хранения применяют замораживание или высушивание (лиофилизация) плазмы. Плазму выпускают во флаконах или пластиковых мешках по 50 — 250 мл. Замороженную плазму хранят при температуре — 25°С в течение 90 дней, при температуре — 10°С — в течение 30 дней. Перед применением ее оттаивают при температуре 37— 38°С. Признаки непригодности плазмы к переливанию: появление в ней массивных сгустков, хлопьев, изменение цвета на тусклый серовато-бурый, появление неприятного запаха.
Плазму применяют с целью замещения плазмопотери при дефиците ОЦК, шоке, для остановки кровотечения, для комплексного парентерального питания. Показаниями к трансфузии служат кровопотери (при кровопотере более 25% крови — в сочетании с трансфузией цельной крови, эритроцитной массы), шок (травматический, операционный), ожоговая болезнь, гемофилия, тяжелые гнойно-воспалительные заболевания, перитонит, сепсис. Противопоказаниями к трансфузии плазмы являются тяжелые аллергические заболевания.
Обычные дозы переливаемой плазмы 100—250 — 500 мл, при лечении шока — 500—1000 мл. Переливание проводят с учетом групповой (АВО) совместимости донора и реципиента.
Сухую плазму получают из замороженной в условиях вакуума. Выпускают во флаконах вместимостью !00; 250; 500 мл. Срок хранения препарата 5 лет. Перед употреблением разводят дистиллированной водой или изотоническим раствором хлорида натрия. Показания к применению те же, что и для нативной или замороженной плазмы, за- исключением того, что применение сухой плазмы с гемостатической целью неэффективно.
Альбумин получают путем фракционирования плазмы. Применяют в растворах, содержащих 5; 10; 20 г белка (альбумина 97%) в 100 мл раствора. Выпускают в виде 5%, 10%, 20% растворов во флаконах вместимостью 50; !00; 250; 500 мл. После разлива во флаконы их пастеризуют на водяной бане при 60°С в течение 10 ч, что исключает опасность передачи сывороточного гепатита. Препарат обладает выраженными онкотическими свойствами, способностью удерживать воду, тем самым увеличивать ОЦК, оказывать противошоковое действие.
Препарат назначают при различных видах шока, ожогах, при гипопротеинемии и гипоальбуминемии у больных с опухолевыми заболеваниями, при тяжелых и длительных гнойно-воспалительных процессах. В сочетании с трансфузией крови и эритроцитарной массы альбумин оказывает выраженный терапевтический эффект при кровопотере, постгеморрагической анемии. Доза препарата: 20% раствор — 100—200 мл; 10% — 200—300 мл; 5%-300—500 мл и более. Вводят препарат капельно со скоростью 40—64) капель в 1 мин, при шоке — струйно.
Относительными противопоказаниями к трансфузии альбумина служат тяжело протекающие аллергические заболевания.
Протеин является 4,3—4,8% изотоническим раствором стабильных пастеризованных белков человеческой плазмы. В его состав-«ходят альбумин (75—80%) и стабильные альфа- и бета-глобулины (20—25%). Общее количество белка составляет 40— 50 г/л. По терапевтическим свойствам протеин близок к плазме. Выпускают во флаконах по 250—500 мл. Показания к применению протеина те же, что и для плазмы. Ежедневная доза препарата у больных гипопротеинемией 250—500 мл раствора. Препарат вводят в течение нескольких дней. При тяжелом шоке, массивной кровопотере доза может быть увеличена до 1500— 2000 мл. Протеин применяют обязательно в сочетании с донорской кровью или эритроцитной массой. Вводят капельно, при тяжелом шоке, низком артериальном давлении — струйно.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУППЫ КРОВИ И РЕЗУС-ФАКТОРА
Для определения групповой принадлежности крови необходимо следующее оснащение; два комплекта стандартных гемагглютинирующих сывороток 1(0), 2(А), 3(В) групп двух различных серий и одна ампула сыворотки 4(АВ) (в каждую ампулу с сывороткой опускают сухую чистую пипетку), флакон с изотоническим раствором хлорида натрия с пипеткой, чисто вымытая сухая тарелка, предметные стекла, стерильные копьевидные иглы для прокола мякоти пальца, стерильные марлевые шарики, спирт. Определение проводят в помещении с хорошим освещением и температурой от 15 до 25°С.
Каждая ампула стандартной сыворотки должна иметь паспорт-этикетку с указанием группы крови, номера серии, титра, срока годности, места изготовления. Ампулой без этикетки пользоваться запрещается. Стандартные сыворотки для определения группы крови по системе АВО выпускают с определенной цветовой маркировкой: 1(0) — бесцветная, 2(А) — голубая, 3(В) — красная, 4(АВ) — желтая. Соответствующая цветовая маркировка имеется на этикетке в виде цветных полос: на этикетке сыворотки 1(0) полос нет, сыворотки 2 (А) — две полосы синего цвета, сыворотки 3(В) — три полосы красного цвета и сыворотки 4(АВ) -четыре полосы желтого цвета. Сыворотки хранят при температуре 4—10°С. Сыворотка должна быть светлой и прозрачной, ампула сохранной. Наличие хлопьев, осадка, помутнение являются признаками непригодности сыворотки. Титр сыворотки должен быть не менее 1 : 32, активность— высокой: первые признаки агглютинации должны появляться не позднее 30 с. Сыворотки с просроченными сроками хранения к использованию не пригодны.
Тарелку делят цветным карандашом на 4 квадрата и в направлении по часовой стрелке обозначают квадраты 1(0), II (А), III (В). В соответствующий квадрат тарелки пипеткой наносят крупную каплю сыворотки двух серий 1(0), 2 (А), III (В) групп. Подушечку пальца обрабатывают спиртом и делают прокол кожи иглой-копьем. Первую каплю крови снимают марлевым шариком, последующие разными уголками предметного стекла вносят последовательно в капли сыворотки и тщательно размешивают. Капля вносимой крови должна быть в 5—10 раз меньше капли сыворотки. Затем путем покачивания тарелки тщательно перемешивают кровь с сывороткой. Предварительные результаты оценивают через 3 мин, после чего добавляют каплю изотонического раствора хлорида натрия, вновь смешивают путем покачивания тарелки и через 5 мин проводят окончательную оценку реакции агглютинации.
При положительной реакции изогемагглютинации хлопья и зернышки из склеившихся эритроцитов не расходятся при добавлении изотонического раствора хлорида натрия и перемешивании. При отрицательной реакции капли сыворотки на тарелке прозрачные, равномерно розового цвета, не содержат хлопьев и зерен. Возможны следующие 4 комбинации реакций агглютинации со стандартными сыворотками 1(0), 2(А), 3(В) групп.
1. Все три сыворотки в обеих сериях не дают агглютинации. Исследуемая кровь 1(0) группы.
2. Реакция изогемагглютинации отрицательная с сывороткой 2 (А) группы обеих серий и положительная с сыворотками 1(0) и 3(В) групп. Исследуемая кровь 2(А) группы.
3. Реакция изогемагглютинации отрицательная с сывороткой 1П(В) группы в обеих сериях и положительная с сывороткой 1(0) и 2(А) групп. Исследуемая кровь 3(В) группы.
4. Сыворотки 1(0), 2(А), 3(В) групп дают положительную реакцию в обеих сериях. Кровь принадлежит 4(АВ) группе. Но прежде чем дать такое заключение, необходимо провести реакцию изогемагглютинации со стандартной сывороткой 4(АВ) группы нотой же методике. Отрицательная реакция изогемагглютинации позволяет окончательно отнести исследуемую кровь к 4(АВ) группе.
Выявление других комбинаций говорит о неправильном определении групповой принадлежности крови больного Сведения о группе крови больного вносят в историю болезни, делают соответствующую отметку на титульном листе за подписью врача, проводившего исследование, с указанием даты исследования.
Ошибки при определении групповой принадлежности крови возможны в ситуациях, когда при фактическом наличии агглютинации она не выявляется или выявляется агглютинация при ее фактическом отсутствии. Не выявленная агглютинация может быть обусловлена:
I) слабой активностью стандартной сыворотки или низкой агглютинабельностью эритроцитов; 2) избыточным количеством исследуемой крови, добавляемой к стандартной сыворотке, 3) замедленной реакцией агглютинации при высокой температуре окружающей среды.
Чтобы избежать ошибок, необходимо использовать активные, с достаточно высоким титром сыворотки при соотношении объема исследуемой крови и стандартной сыворотки 1:5, Г: 10. Исследование проводят при температуре не выше 25°С; оценивать результаты следует не ранее чем через 5 мин от начала исследования.
Выявление агглютинации при ее фактическом отсутствии может быть обусловлено подсыханием капли сыворотки и образованием «монетных» столбиков эритроцитов или проявлением холодовой агглютинации, если исследование проводят при температуре окружающей среды ниже 15°С. Добавление капли изотонического раствора хлорида натрия к исследуемой крови и сыворотке и проведение исследований при температуре выше 15°С позволяют избежать указанных ошибок. Ошибки в определении группы крови всегда связаны с нарушением методики исследования, поэтому необходимо тщательное соблюдение всех правил исследования.
Во всех сомнительных случаях необходимо произвести повторное исследование групповой принадлежности со стандартными сыворотками других серий или с помощью стандартных эритроцитов.
Определение группы крови системы АВО с помощью моноклональных антител анти-А и анти-В (целиклоны анти-А и анти-В). Целиклоны анти-А н анти-В применяются для определения группы крови человека системы АВО взамен стандартных изогемагглютиннруюших сывороток путем выявления антигенов А и В в эритроцитах стандартными антителами, содержащимися в целиклонах:
Моноклональные антитела анти-А и анти-В продуцируются двумя различными гибридомами, полученными в результате слияния мышиных антителообразующих В-лимфоцитов с клетками мышиной миеломы. Названные целиклоны представляют разведенную асцитическую жидкость мышей — носителей гибридомы, содержащую иммуноглобулин М против антигенов А и В. Целиклоны дают более быструю и более выраженную реакцию агглютинации, чем стандартные АВО-сыворотки. При использовании целиклонов исключается передача вируса гепатита и ВИЧ.
Определяют группу крови при температуре от 15 до 25°С. На фарфоровую пластину или маркированную тарелку наносят по одной большой капле целиклонов анти-А и анти-В, рядом наносят каплю исследуемой крови в 10 раз меньшего размера и смешивают отдельными палочками или уголками предметных стекол. Пластинку слегка покачивают и наблюдают за реакцией в течение 2,5 мин. Реакция обычно наступает впервые 3—5 с и проявляется образованием мелких красных агрегатов, а затем хлопьев. Возможны следующие варианты реакции агглютинации.
1. Агглютинация отсутствует с целиклонами анти-А и анти-В - кровь не содержит агглютиногенов А и В — исследуемая кровь группы 1
2. Агглютинация наблюдается с целиклонами анти-А, эритро- циты исследуемой крови содержат агглютиноген А — исследуе мая кровь группы II (А).
3. Агглютинация наблюдается с целиклоном анти-В. Эритро циты исследуемой крови содержат агглютиноген В — исследуемая кровь группы II(В).
4. Агглютинация наблюдается с целиклонами анти-А и анти-В. Эритроциты содержат агглютиногены А и В — исследуемая кровь группы 4(АВ)
5. При наличии реакции агглютинации с целиклонами анти-А и анти-В [группа крови 4(АВ)] для исключения неспецифической агглютинации производят дополнительное контрольное исследование с изотоническим раствором хлорида натрия. Большую каплю (0,1 мл) изотонического раствора смешивают с маленькой (0,01 мл) каплей исследуемой крови. Отсутствие агглютинации подтверждает принадлежность исследуемой крови к 4(АВ) группе. При наличии агглютинации проводят определение группы крови с использованием отмытых стандартных эритроцитов.
Цел и клоны анти-А и анти-В выпускаются в жидком виде в ампулах или флаконах, жидкость окрашена в красный (анти-А) и синий (анти-В) цвет. Хранят их в холодильнике при температуре 2—8°С. Срок хранения 2 года.
Определение резус-фактора. Исследование крови на резус-принадлежность методом конглютинации проводят с помощью специальных сывороток анти-резус в лабораторных условиях. В экстренных ситуациях возможно определение резус-фактора экспресс методом у постели больного. Предварительно проводят определение групповой принадлежности (по системе АВО).
Оснащение: две различные серии стандартных сывороток антирезус, соответствующих групповой принадлежности определяемой крови, или совместимые в групповом отношении стандартные отмытые одногруппные резус-положительные и резус-отрицательные эритроциты, чашка Петри, водяная баня, пипетки для сывороток, предметные стекла или стеклянные палочки.
На чашку Петри наносят подряд 3 большие капли сыворотки анти-резус одной серии и параллельно — 3 капли сыворотки другой серии, получая два горизонтальных ряда сывороток. Затем в 1-Й вертикальный ряд сывороток обеих серий вносят по небольшой капле исследуемой крови (соотношение сыворотки и крови 1.0 : 1 или 5 : 1), в средний ряд — по такой же капле стандартных резус-положительных эритроцитов (контроль активности) и в 3-й ряд — резус-отрицательные стандартные эритроциты (контроль специфичности). Отдельной для каждой капли стеклянной палочкой или углом предметного стекла тщательно перемешивают сыворотку и эритроциты, чашки закрывают крышкой и помещают на водяную баню при температуре 46—48°С. Спустя 10 мин учитывают результат, просматривая чашку в проходящем свете. В капле со стандартными резус-положительными эритроцитами должна быть агглютинация, в капле с резус-отрицательными эритроцитами она должна отсутствовать. Если в каплях обеих серий сывороток с исследуемыми эритроцитами определяется агглютинация, кровь резус положительная, если она отсутствует,— кровь резус-отрицательная.
Следует помнить о том, что добавлять изотонический раствор хлорида натрия в каплю сыворотки, как это принято при определении групповой принадлежности крови по системе АВО, категорически запрещено, так как это может нарушить реакцию агглютинации.
Ошибки при определении резус-фактора обусловлены или снижением активности стандартных сывороток анти-резус, или нарушением пропорции сыворотка — кровь, несоблюдением температурного режима при исследовании, уменьшением времени экспозиции (менее 10 мин), добавлением изотонического раствора хлорида натрия, отсутствием контрольных проб на активность и специфичность сыворотки, групповыми несоответствиями стандартных сывороток и исследуемых и стандартных эритроцитов.
Для экспресс-метода определения резус-фактора используют специальный реагент - сыворотку анти-резус 4(АВ) группы, разведенную 20—30% раствором альбумина человека или 30— 33% раствора полиглюкина, используемую как вещество, способствующее агрегации эритроцитов при комнатной температуре.
Каплю стандартной сыворотки анти-резус 4(АВ) группы наносят на предметное стекло или чашку Петри и параллельно наносят каплю резус-отрицательной сыворотки 4(АВ) группы, не содержащей антител. К ним добавляют в 2—3 раза меньшего объема каплю исследуемой крови, перемешивают углом предметного стекла, стеклянной палочкой или путем покачивания в течение 3—4 мин, после чего добавляют по 1 капле изотонического раствора хлорида натрия и по истечении 5 мин учитывают реакцию. При наличии агглютинации эритроцитов с сывороткой анти-резус и отсутствии с контрольной сывороткой кровь резус-положительная, при отсутствии агглютинации с обеими сыворотками кровь резус-отрицательная. В случаях появления агглютинации с обеими сыворотками реакцию следует рассматривать как сомнительную и для экстренного переливания следует использовать только резус-отрицательную кровь, а при ее отсутствии в опасной для жизни больного ситуации возможно переливание резус-положительной крови после проведения пробы на совместимость по резус-фактору.
МЕТОДЫ ПЕРЕЛИВАНИЯ КРОВИ
I) переливание консервированной крови 2) прямое переливание крови.3) обменные переливании; 4) аутогемотрансфузия
Обменное переливание крови представляет собой частичное или полное удаление крови из кровяного .русла реципиента одновременное возмещение ее таким же количеством вливаемой крови. Показаниями к обменной трансфузии служат различные отравления, гемолитическая болезнь новорожденных, гемотрансфузионный шок, острая почечная недостаточность. При обменном переливании удаляют вместе с эксфузируемой кровью яды, токсины. Вливание крови проводят с заместительной целью.
Для обменного переливания используют свежеконсервированную или консервированную кровь небольших сроков хранения. Кровь переливают в любую поверхностную вену, эксфузию проводят из крупных вен или артерий для предупреждения свертывания крови при длительной процедуре. Удаление крови и вливание донорской крови производят одновременно со средней скоростью 1000 мл за 15—20 мин. Для полноценного замещения крови требуется 10—15 л донорской крови.
Аутогемотрансфузия — переливание больному собственной крови, взятой у него заблаговременно до операции, непосредственно перед или во время операции. Целью аутогемотрансфузии является возмещение потери крови во время операции собственной кровью больного, лишенной отрицательных свойств донорской крови. Аутогемотрансфузия исключает возможные осложнения при переливании донорской крови: иммунизацию реципиента, развитие синдрома гомологичной крови, а кроме того, позволяет преодолеть трудности подбора индивидуального донора для больных с наличием антител к антигенам эритроцитов, не входящих в систему АВО и резус Показания к аутогемотрансфузии следующие: редкая группа крови больного, невозможность подбора донора, риск развития тяжелых посттрансфузионных осложнений, операции, сопровож- дающиеся большой кровопотерей. Противопоказаниями к аутоге- мотрансфузии служат воспалительные заболевания, тяжелые за- болевания печени и почек в стадии кахексии, поздние стадии злокачественных заболеваний.
Ранее других известен метод реинфузии крови, или обратного переливания крови, излившейся в серозные полости - брюшную или плевральную вследствие травматического повреждения, заболеваний внутренних органов или операции. Реинфузин крови при повреждении органов живота применяется при нарушенной внематочной беременности, разрыве селезенки, печени, сосудов брыжейки, при закрытом повреждении органов груди -разрыве внутригрудных сосудов, легкого. Противопоказаниями к реинфузии служат повреждения полых органов груди — крупных бронхов, пищевода и полых органов брюшной полости -желудка, кишечника, желчного пузыря, внепеченочных желчных путей, мочевого пузыря, а также наличие злокачественных новообразований. Не рекомендуется переливать кровь, находившуюся в брюшной полости более 24 ч.
Для консервации крови пользуются или раствором ЦОЛИПК № 76 в соотношении с кровью 1 : 4, или раствором гепарина -10 мг в 50 мл изотонического раствора хлорида натрия на флакон вместимостью 500 мл. Кровь забирают металлическим черпаком или большой ложкой путем вычерпывания и сразу же фильтруют через 8 слоев марли или с помощью отсоса с разрежением не менее 0,2 атм. Метод сбора крови с помощью аспирации наиболее перспективен. Кровь, добранную во флаконы со стабилизатором, подвергают фильтрованию через 8 слоев марли. Кровь вливают •через систему для переливания с использованием стандартных фильтров.
Реинфузия весьма эффективна при восполнении кровопотери во время операции, когда собирают и вливают больному кровь, излившуюся в операционную рану. Кровь собирают с помощью вакуумирования во флаконы со стабилизатором с последующей фильтрацией через 8 слоев марли и переливанием через систему со стандартным микрофильтром. Противопоказаниями к реинфузии крови, излившейся в рану, служат загрязнение крови гноем, кишечным, желудочным содержимым, кровотечения при разрывах матки, злокачественные новообразования.
Аутотрансфузия предварительно заготовленной крови предусматривает эксфузию и консервацию крови. Эксфузию крови наиболее целесообразно проводить за 4—6 дней до операции, так как за этот период достигается восстановление кровопотери, а взятая кровь хорошо сохраняет свои свойства. В восстановлении кропопотери играет роль не только перемещение межтканевой жидкости в кровеносное русло, как это имеет место при любой кровопотере, но и стимулирующее действие взятия
крови на кроветворение. При таком способе заготовки крови объем ее не превышает 500 мл. При поэтапной заготовке крови, которую проводят при длительной подготовке к операции, возможно заготовить до 1000 мл за !5 дней и даже 1500 мл крови за 25 дней. При таком способе заготовки аутокрови у больного вначале берут 300—400 мл крови, а через 4—5 дней кровь больному возвращают и вновь берут на 200—250 мл больше, повторяя такой забор 2—3 раза. Такой способ позволяет заготовить достаточно большое количество крови, а аутокровь сохраняет свои качества, так как срок хранения ее не превышает 4—5 дней.
Для сохранения крови используют консервирующие растворы ЦОЛИПК № 76 и ЦОЛИПК № 12. Кровь берут во флаконы с консервантом и хранят при температуре 4°С. Длительно сохранить аутокровь можно путем замораживания при сверхнизких температурах (—196°С).
Одним из способов уменьшения операционной кровопотери является гемодилюция (разведение крови), которая проводится непосредственно перед операцией. При этом больной во время операции теряет разжиженную, разведенную кровь с уменьшенным содержанием форменных элементов и плазменных факторов.
Кровь для аутотрансфузии заготавливают непосредственно перед операцией, когда проводят эксфузию крови из вены во флаконы с консервантом ЦОЛИПК № 76 и одновременно вводят гемодилютант, содержащий реополиглюкин, 20% раствор альбумина и раствор Рингера — Локка. При умеренной гемодилюции объем эксфузируемой крови должен быть в пределах 800 мл, объем вводимой жидкости -1100—1200 мл (реополиглюкин — 400 мл, раствор Рингера -Локка—500—600 мл, 20% раствор альбумина—100 мл). Значительная гемодилюция (снижение гематокрита на '/з) предусматривает взятие крови в пределах 1200 мл, введение растворов в пределах 1600 мл (реополиглюкин —700 мл, раствор Рингера -Локка —750 мл, 20% раствор альбумина —150 мл). По окончании операции аутокровь возвращают больному.
Метод гемодилюции может быть применен перед операцией для уменьшения кровопотери и без эксфузии крови за счет введения инфузионных сред, хорошо удерживающихся в сосудистом русле благодаря коллоидным свойствам и увеличивающих объем циркулирующей крови (альбумин, полиглюкин, желатиноль) в сочетании с солевыми кровезамещающими жидкостями (раствор Рингера — Локка).
Аутоплазмотрансфузия. Возмещение кровопотери можно осуществлять собственной плазмой больного с целью обеспечения операции идеальным кровезамещающим средством и предупреждения синдрома гомологичной крови. Аутоплазмотрансфузия может применяться для возмещения кровопотери при заготовке аутокрови. Аутоплазму получают методом плазмафереза и консервируют; одномоментная безвредная доза эксфузии плазмы составляет 500 мл. Повторять эксфузию можно через 5—7 дней. В качестве консерванта применяют глюкозоцитратный раствор. Для возмещения операционной кровопотери аутоплазму переливают как кровезамещающую жидкость или как составную часть крови. Комбинация аутоплазмы с отмытыми размороженными эритроцитами позволяет предупредить синдром гомологичной крови.